ISSN: 0103-846X eISSN: 1984-2961 Subject:
veterinary science
Published by SciELO 
No Issue Number- A new laboratorial method for the diagnosis of gastrointestinal parasites in dogs
In this study, we aimed to introduce a new technique called TF-Test Modified∕Dog for the diagnosis of gastrointestinal parasites in dogs. Fecal samples from 106 dogs were processed by the technique TF-Test Modified∕Dog and the techniques of centrifugation-flotation in zinc sulfate, simple-flotation by saturated solution of sodium chloride, direct microscopy exam and TF-Test Conventional. Sensitivity was higher in the TF-Test Modified∕Dog (98.41%), followed by flotation in saturated zinc sulfate (77.78%), TF-Test Conventional (73.02%), flotation by saturated sodium chloride (55.55%), and direct microscopy exam (30.16%). The diagnostic efficiency varied from 58.49% to 99.06%, with the highest value also obtained by the new proposed technique. Efficiency level of 99.06% with kappa index 0.979 (almost perfect) was obtained with the TF-Test Modified∕Dog. These results represent significant statistical gains (P < 0.05) of 20.63% in sensitivity and 12.27% in efficiency over the best among the other techniques – flotation by saturated zinc sulfate, whose kappa index was 0.738, much lower than that of the TF-Test Modified∕Dog. All techniques presented 100% specificity. In this sense, the high sensitivity of the TF-Test Modified∕Dog makes it suitable for epidemiological surveys of gastrointestinal parasitosis in dogs, zoonoses control and preventive surveillance programs. O objetivo deste estudo foi introduzir a nova técnica TF-Test Modified∕Dog para diagnóstico de parasitos gastrointestinais em cães. Amostras fecais de 106 cães foram processadas pela técnica de TF-Test Modified∕Dog e também por técnicas de centrifugação-flutuação em sulfato de zinco, flutuação simples em solução saturada de cloreto de sódio, exame microscópico direto e TF-Test Convencional. A sensibilidade foi maior no TF-Test Modified∕Dog (98,41%), seguido por centrífugo-flutuação em solução de sulfato de zinco (77,78%), TF-Test Convencional (73,02%), flutuação em solução saturada de cloreto de sódio (55,55%), e exame microscópico direto (30,16%). A eficiência diagnóstica variou de 58,49% a 99,06%, com maior valor obtido pela nova técnica. Foi obtido com o TF-Test Modified∕Dog eficiência de 99,06%, com índice kappa de 0,979 (Quase perfeito). Estes resultados representam ganhos estatisticamente significativos (P < 0,05) de 20,63% de sensibilidade e 12,27% de eficiência sobre a melhor entre as outras técnicas empregadas, centrífugo-flutuação em solução de sulfato de zinco, cujo índice kappa foi 0,738, bem menor do que o TF-Test Modified∕Dog. Todas as técnicas apresentaram especificidade de 100%. Nesse sentido, a sua alta sensibilidade o torna adequado para levantamentos epidemiológicos das parasitoses gastrointestinais em cães, bem como para programas de controle de zoonoses e de vigilância preventiva.
- Ticks infesting birds in Atlantic Forest fragments in Rio Claro, State of Sao Paulo, Brazil
In the present study, we report tick infestations on wild birds in plots of the Atlantic Forest reforested fragments with native species and plots reforested with Eucalyptus tereticornis in the municipality of Rio Claro, State of Sao Paulo, Brazil. A total of 256 birds were captured: 137 individuals of 33 species, in planted native forest; and 128 individuals of 37 species, in planted Eucalyptus tereticornis forest. Nymphs of two tick species were found on the birds: Amblyomma calcaratum and Amblyomma longirostre, the former was more abundant in the fragments reforested with Atlantic forest native species, and the latter in the fragment reforested with E. tereticornis. New host records were presented for A. calcaratum. O presente estudo apresenta infestações de carrapatos em aves silvestres em fragmentos de reflorestamento com espécies nativas e fragmentos de reflorestamento com Eucalyptus tereticornis no município de Rio Claro, São Paulo. No total foram capturadas 265 aves, sendo 137 indivíduos de 33 espécies nas áreas de reflorestamento com espécies nativas e 128 indivíduos de 37 espécies nas áreas reflorestadas com Eucalyptus tereticornis. Ninfas de duas espécies de carrapatos foram registradas: Amblyomma calcaratum e Amblyomma longirostre, sendo a primeira mais abundante na área nativa e a segunda na área de Eucalyptus tereticornis. Novos registros de hospedeiros para A. calcaratum são apresentados.
- <italic>Neospora caninum:</italic> evaluation of vertical transmission in slaughtered dairy cows (<italic>Bos taurus</italic>)
Neospora caninum is a worldwide parasite recognized as one of the main parasites responsible for abortion in cattle. The objective of this study was to evaluate vertical transmission of N. caninum in dairy cows (Bos taurus) that were slaughtered at an abattoir in the state of Santa Catarina, southern Brazil. Blood samples (with and without EDTA) from 60 pregnant dairy cows and blood and tissue samples (brain, lung, heart and liver) from their fetuses were collected and used for PCR and serological evaluation. Blood samples from 60 non-pregnant cows were collected and used to detect antibodies. Anti-N. caninum antibodies were detected by indirect ELISA. Antibodies against N. caninum were observed in 41.6% (25∕60) of the pregnant cows and in 43.3% (26∕60) of the non-pregnant cows. Antibodies against the parasite were detected in sera from three fetuses (5.5%). PCR analysis revealed that 3.3% (2∕60) of the cows and 6.6% (4∕60) of the fetuses evaluated were positive for specific N. caninum primers. These positive fetuses were between 4-6 months of age. Therefore, considering PCR and serological tests to be indicative of vertical transmission in fetuses, 11.6% (7∕60) of the fetuses were infected by N. caninum during gestation. Neospora caninum é um parasita de distribuição mundial reconhecido como um dentre os principais parasitas, responsável por abortamento em bovinos. O objetivo deste estudo foi avaliar a transmissão vertical de N. caninum em vacas leiteiras (Bos taurus) que foram submetidas ao abate em matadouro no Estado de Santa Catarina, sul do Brasil. Sangue (com e sem EDTA) de 60 vacas leiteiras prenhas e amostras de sangue e tecidos (cérebro, pulmão, coração e fígado) de seus fetos foram coletados e utilizados para PCR e avaliação sorológica. Amostras de sangue de 60 vacas não-gestantes foram obtidas e utilizadas para detecção de anticorpos. A detecção de anticorpos séricos anti-N. caninum foi avaliada pelo ELISA-teste indireto. Anticorpos anti-N. caninum foram observados em 41,6% (25∕60) das vacas prenhas e em 43,3% (26∕60) das vacas não-gestantes. Três fetos (5,5%) foram soros positivos para N. caninum. Análise pela PCR revelou que 3,3% (2∕60) das vacas e 6,6% (4∕60) dos fetos avaliados foram positivos para N. caninum. As idades dos fetos positivos eram de 4 a 6 meses. Portanto, considerando a PCR e a sorologia como indicativo de transmissão vertical em fetos, 11,6% (7∕60) dos fetos foram infectados por N. caninum durante a gestação.
- Prevalence of <italic>Oestrus ovis</italic> (Diptera: Oestridae) in sheep from the São Paulo Central region, Brazil
The heads of 139 slaughtered sheep were examined with the aim of determining Oestrus ovis prevalence and infestation intensity in the central region of the State of São Paulo, Brazil. Heads from slaughtered sheep were examined and the first (L1), second (L2) and third (L3) O. ovis larval instars were recovered from the nasal and sinus cavities. O. ovis larvae were detected in 13.7% of the sheep analyzed. The monthly mean intensity of infestation ranged from 1 to 10.2 larvae per infested head, with general mean intensity of 4.5 larvae/infested head. Of the total of 85 larvae, 21.2% were L1, 37.6% L2 and 41.2% L3. In conclusion, all different O. ovis larvae instars were recovered from slaughtered animals, which demonstrates the existence of favorable climatic conditions for the fly activity and larval development of O. ovis in sheep raised in the Central region of the State of São Paulo. Com o objetivo de determinar a prevalência e intensidade de infestação por larvas de Oestrus ovis na região Central do Estado de São Paulo, 139 cabeças de ovinos obtidas de um abatedouro foram examinadas. As larvas O. ovis foram recuperadas da cavidade nasal e seios frontais, identificadas de acordo com o estádio larval e quantificadas. As larvas de O. ovis foram detectadas em 13,7% das cabeças examinadas e a intensidade média mensal de infestação variou entre 1 a 10,2 larvas/cabeça infestada, com média geral de 4,5 larvas/cabeça infestada. Do total de 85 larvas recuperadas, 21,2% eram larvas de primeiro estádio (L1), 37,6% de segundo (L2) e 41,2% de terceiro (L3). Em conclusão, todos os diferentes instares larvais de O. ovis foram recuperados de animais abatidos, o que demonstra a existência de condições climáticas favoráveis para a atividade da mosca bem como o desenvolvimento larval em ovinos criados na região Central do Estado de São Paulo.
- Identification of <italic>Cryptosporidium</italic> species and genotypes in dairy cattle in Brazil
In this study, we identified Cryptosporidium species and genotypes present in dairy cattle in the central region of São Paulo state, Brazil. Fecal specimens were collected from 200 animals (100 calves and 100 cows) in ten dairy farms. Fecal samples were examined using microscopic examination (ME), enzyme immunoassay (EIA) and polymerase chain reaction (PCR). Cryptosporidium species and genotypes were determined by restriction fragment length polymorphism (RFLP) or DNA sequencing analysis of the SSU-rRNA and GP60 genes. The occurrence of Cryptosporidium spp. infection was 14% (28/200). The occurrence in calves (26%) was significantly higher than in cows (2%). Of the 27 Cryptosporidium-positive specimens submitted to genotyping, C. andersoni was identified in 23 (85.1%), C. bovis in three (11.1%), and the zoonotic C. parvum subtype IIaA15G2R1 in one (3.7%). The study demonstrates that Cryptosporidium spp. infection was common and widespread in dairy cattle in this region and that calves have a high prevalence of C. andersoni. Furthermore, the presence of C. parvum subtype IIaA15G2R1 indicates that dairy calves from this region should be considered a potential source of zoonotic Cryptosporidium oocysts. No presente estudo foram identificadas espécies e genótipos de Cryptosporidium originadas de bovinos leiteiros na região central do estado de São Paulo, Brasil. Amostras fecais foram coletadas de 200 animais (100 bezerros e 100 vacas) em 10 propriedades leiteiras. As amostras foram examinadas utilizando os métodos de microscopia óptica (MO), ensaio imunoenzimático (EI) e reação em cadeia da polimerase (PCR). As espécies e genótipos de Cryptosporidium foram determinados pelo método de polimorfismo no tamanho dos fragmentos de restrição (RFLP) ou sequenciamento dos genes SSU-rRNA e GP60. A infecção por Cryptosporidium spp. teve ocorrência de 14% (28/200). A ocorrência em bezerros (26%) foi significativamente maior do que em vacas (2%). Do total de 27 amostras positivas submetidas à caracterização genética, C. andersoni foi identificado em 23 (85.1%), C. bovis em três (11.1%) e C. parvum subtipo IIaA15G2R1 em uma (3.7%). O presente estudo demonstrou que a infecção por Cyptosporidium é comum e difundida em bovinos leiteiros nessa região e que bezerros possuem uma alta prevalência de C. andersoni. A presença de C. parvum subtipo IIaA15G2R1 indica que bezerros leiteiros dessa região devem ser considerados uma fonte de oocistos de Cryptosporidium com potencial zoonótico.
- Anatomopathological study of parrot pufferfish <italic>Colomesus psittacus</italic> parasitized by the aspidogastrean <italic>Rohdella</italic> sp.
Aspidogastrea are globally-distributed parasites of the class Trematoda, which have been described as pathogens of a range of aquatic organisms, in marine and freshwater environments. The principal morphological characteristic of the group is an adhesive ventral disc, which is responsible for fixing the parasite to the host organism. In this study, 112 specimens of Colomesus psittacus from the municipality of Cametá, in the state of Pará (Brazil), were necropsied. Platyhelminthes of the genus Rohdella attached to the mucous membrane of the fish's intestine by the adhesive disc were observed. Fragments of parasitized tissue were fixed in Davidson solution and then processed and stained with hematoxylin-eosin. Other fragments were fixed in glutaraldehyde, processed and observed under a scanning electron microscope. The prevalence of the parasite was 76.4%, mean intensity of infection was 8.0 and mean abundance was 6.2. The parasitism provoked chronic enteritis with diffused inflammatory infiltration. The adherence of the parasite to the mucous membrane of the intestine resulted in strangulation and hyperplasia of the region, as well as causing hypertrophy of the muscle of the mucous membrane. The present study describes the anatomopathological and ultrastructural aspects of the parasitism of the intestine of C. psittacus by Rohdella sp. Os Aspidogastreas são parasitos da classe Trematoda, distribuídos globalmente e têm sido descritos como patógenos em uma gama de organismos aquáticos de ambientes marinhos e de água doce. A principal característica morfológica do grupo é um disco adesivo na região ventral responsável pela fixação do parasito no organismo hospedeiro. Neste estudo, 112 espécimes de Colomesus psittacus provenientes do município de Cametá, no estado do Pará (Brasil), foram necropsiados. Foram observados platelmintos do gênero Rohdella aderidos à mucosa intestinal através do disco adesivo. Fragmentos de tecido com parasito foram fixados em solução de Davidson e processados e corados em Hematoxilina-Eosina. Outros fragmentos foram fixados em glutaraldeído, processados e observados em microscopia eletrônica de varredura. A prevalência parasitária foi de 76, 4%, intensidade média de infecção de 8,0 e abundância média de 6,2. O parasitismo ocasionou uma enterite crônica com difuso infiltrado inflamatório. A fixação do parasito na mucosa intestinal provocou estrangulamento e hiperplasia da região, bem como hipertrofia da muscular da mucosa. O presente trabalho descreve os aspectos anatomopatológicos e ultra-estruturais da ação parasitária por Rohdella sp. no trato intestinal de C. psittacus.
- Parasites of four ornamental fish from the Chumucuí River (Bragança, Pará, Brazil)
The objective of the present study was to evaluate the parasite fauna of four species of ornamental fish collected in the Chumucuí River, municipality of Bragança, Pará, Brazil. From June 2006 to December 2007. Fishes (n=307) belonging to four species were collected, including 23 specimens of Moenkhausia sanctaefilomenae (redeye tetra), 37 Carnegiella strigata (marbled hatchetfish), 7 Chilodus punctatus (spotted headstander), and 240 Astyanax bimaculatus (twospot astyanax). The parasites found belonged to three taxa: monogeneans in the gills, nematodes (larvae of Capillaria sp. and Contracaecum sp.) in the digestive tract and liver and acanthocephalans (Quadrigyrus torquatus, Q. brasiliensis and Q. nickoli) in the stomach and intestine. Astyanax bimaculatus presented higher prevalence of acanthocephalans in the wet season, and lower prevalence of nematodes in the dry season. The possible importance of these parasites in the exportation of ornamental fish is discussed. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a fauna parasitária de quatro espécies de peixes ornamentais capturados no rio Chumucuí, no município de Bragança-PA. Foram coletados um total de 307 peixes pertencentes a 4 espécies, sendo elas: Moenkhausia sanctaefilomenae (olho de fogo, n = 23), Carnegiella strigata (borboleta, n = 37), Chilodus punctatus (cabeça-para-baixo, n = 7) e Astyanax bimaculatus (lambari, n = 240) coletados de junho de 2006 a dezembro de 2007. Foram observados 3 taxa parasitando os peixes: monogenéticos nas brânquias, nematóides (larvas de Capillaria sp. e Contracaecum sp.) no trato digestório e fígado e acantocéfalos (Quadrigyrus torquatus, Q. brasiliensis e Q. nickoli) no estômago e intestino. Astyanax bimaculatus apresentou maior prevalência de acantocéfalos na estação chuvosa, menor prevalência de nematóides na estação seca. Discute-se a eventual importância destes parasitas na exportação de peixes ornamentais.
- Seroepidemiological aspects of <italic>Leishmania</italic> spp. in dogs in the Itaguai micro-region, Rio de Janeiro, Brazil
This study evaluated factors associated with the frequency of Leishmania spp. antibodies in dogs residing in the Itaguai micro-region, State of Rio de Janeiro, Brazil. Blood samples were collected from 524 dogs. The serum samples were submitted to indirect fluorescent antibody test (IFAT) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for Leishmania spp. The frequency of seropositive dogs was 28.24% (n = 148) in the micro-region, and among the three municipalities within that region, the highest frequency (p < 0.05) was observed in Seropedica (59.46%), followed by Itaguai (29.05%) and Mangaratiba (11.49%). Regarding factors associated with the host, mongrel dogs and those over the age of two presented higher frequency of antibodies to Leishmania spp. (p < 0.05). Concerning factors related to the environment and habits of the animal, dogs residing in rural areas (FR = 1.67, p = 0.0002), living outside the residence (FR = 1.42, p = 0.0197), with access to forest, streams and pastures (FR = 2.81, p = 0.0007), remaining loose (FR = 1.66, p = 0.0073), and those that had no shelter (FR = 2.16, p < 0.0001) were more likely to be seropositive. Canine leishmaniasis is a disease with high occurrence in the Itaguai micro-region, and aspects such as the definition of breed, age, habits and care by owners showed significant association in this micro-region. Este estudo avaliou os fatores associados à frequência de anticorpos específicos para Leishmania spp. em cães domiciliados na microrregião de Itaguaí, Rio de Janeiro. Foram colhidas amostras de sangue de 524 cães. As amostras de soro foram submetidas a reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e ensaio imunoenzimático indireto (ELISA-teste) para Leishmania spp. A frequência de cães soropositivos foi de 28,24% (n = 148) na microrregião e, entre os três municípios avaliados, a maior frequência (p < 0,05) foi observada em Seropédica (59,46%), seguida de Itaguaí (29,05%) e Mangaratiba (11,49%). Em relação aos fatores associados ao hospedeiro, observou-se que cães sem raça definida e aqueles com idade acima de dois anos apresentaram maior frequência de anticorpos para Leishmania spp. (p < 0,05). Em relação aos fatores relacionados ao ambiente e ao hábito do animal, os cães residentes em áreas rurais (RF = 1,67, p = 0,0002), animais que vivem fora da residência (RF = 1,42, p = 0,0197), com acesso à mata, córregos e pastagens (FR = 2,81, p = 0,0007), que permanecem soltos (RF = 1,66, p = 0,0073), e aqueles que não possuem abrigo (RF = 2,16, p < 0,0001) apresentaram maior chance de serem soropositivos. A leishmaniose canina é uma enfermidade com elevada ocorrência na microrregião de Itaguai, e aspectos como definição racial, idade, hábitos e cuidados estabelecidos pelo proprietário mostraram associação significativa nessa microrregião.
- Ticks on birds in a savanna (Cerrado) reserve on the outskirts of Uberlândia, Minas Gerais, Brazil
We report tick infestations on birds, in the environment and on domestic animals in a non-forested phytophysiognomy, the savanna-like Cerrado sensu stricto, in a natural reserve on the outskirts of the urban area of Uberlândia, Minas Gerais, Brazil. Overall, 238 birds within 50 species, 15 families and six orders were caught. Passeriformes were the most numerous, with 216 birds (90.75%), among which 22 had ticks (n = 31). Within this order, the prevalence of tick infestation was 10.2%, and the abundance and mean intensity were 0.14 and 1.41, respectively. Only immature ticks of the species Amblyomma nodosum were found on the birds. The tick species found both on animals (Rhipicephalus sanguineus, Rhipicephalus (Boophilus) microplus, Amblyomma cajennense and Dermacentor nitens) and in the environment (Amblyomma dubitatum, Rhipicephalus (B.) microplus and Amblyomma cajennense) were as expected. This difference in tick species between the environment and birds possibly occurred because the sampling of the environment was limited to the ground. This study also highlights the importance of the diverse microenvironments used by ticks and hosts in the same area and the complex ecology of bird-tick relationships. Ecological and epidemiological aspects of the findings are discussed. Nesse trabalho relatam-se infestações de carrapatos em aves, meio ambiente e em animais domésticos em uma fitofisionomia não florestal, o Cerrado stricto sensu, de uma reserva natural na periferia da área urbana de Uberlândia, Minas Gerais, Brasil. Para tal, 238 aves de 50 espécies foram capturadas, pertencentes a 15 famílias e seis ordens. Passeriforme foi a mais numerosa, com 216 indivíduos (90,75%), dos quais 22 estavam parasitados com 31 carrapatos. Nos Passeriformes a prevalência de infestação de carrapatos foi de 10,2%, a abundância e intensidade média foi de 0,14 e 1,41, respectivamente. Apenas carrapatos imaturos da espécie Amblyomma nodosum foram encontrados em aves. As espécies de carrapatos encontradas tanto em animais (Rhipicephalus sanguineus, Rhipicephalus (Boophilus) microplus, Amblyomma cajennense, Dermacentor nitens) como no ambiente (Amblyomma dubitatum, Rhipicephalus (B.) microplus, Amblyomma cajennense) foram aquelas já esperadas. Esta diferença de espécies de carrapatos entre ambiente e de aves possivelmente ocorreu porque a amostragem do ambiente se restringiu ao solo. Esse estudo também destaca a importância dos diversos microambientes usados por carrapatos e hospedeiros em uma mesma área e a complexa ecologia das relações ave-carrapato. Aspectos ecológicos e epidemiológicos dos achados são discutidos.
- <italic>Fasciola hepatica</italic> infection and association with gastrointestinal parasites in Creole goats from western Argentina
Goats, called “the cow of the poor”, are the livestock species with the most significant population growth worldwide in recent years. Gastrointestinal parasitism constitutes one of the main constraints to its outdoor and extensive breeding in temperate and tropical countries. Despite a Creole goat population of nearly 4 million heads, local reports on parasitological prevalence are scarce, and while Fasciola hepatica infection is spread all over Argentina, the goat is usually neglected as a reservoir and economic losses are not considered. To evaluate gastrointestinal parasitism prevalence and associations between parasite genera and species, with emphasis on fascioliasis, Creole goats from the plateau and Andean regions from western Argentina were investigated by coprological techniques, and associations were statistically assessed. Eighty-five percent (85%) of the animals harbored one or more parasite types, while 46% showed mixed infections. Significant positive associations between F. hepatica + Strongyle eggs, Eimeria sp. + Nematodirus sp. and Nematodirus sp. + Trichuris ovis were detected. Further studies are required to define the causality of these associations and their relevance in epidemiology. F. hepatica is rarely considered as goat parasite in the country, but a 33% prevalence poses an interrogation on the role goats play on the transmission and dissemination of this zoonotic trematode. As cabras, nomeadas como “a vaca dos pobres”, são as espécies de gado com o crescimento populacional mais significativo nos últimos anos em todo o mundo. O parasitismo gastrintestinal constitui uma das principais limitações à sua criação extensiva em clima temperado e tropical. Na Argentina, apesar de uma população de caprinos crioulos de cerca de quatro milhões de cabeças, são escassos os relatórios locais de prevalências parasitológicas. Embora a infecção por Fasciola hepatica esteja espalhada em todo o país, as cabras são geralmente negligenciadas como um reservatório, e as perdas econômicas não são consideradas. Para avaliar a prevalência do parasitismo gastrintestinal e associações entre os gêneros e espécies de parasitos, com ênfase na fasciolose, caprinos crioulos da região andina e do planalto do oeste de Argentina foram avaliados por meio de técnicas coprológicas. Oitenta e cinco por cento dos animais hospedaram um ou mais tipos de parasitos, enquanto 46% hospedaram infecções mistas. Foram encontradas associações significativas entre F. hepatica + ovos de estrongilídeos, Eimeria sp. + Nematodirus sp. e Nematodirus sp. + Trichuris ovis. Mais estudos são necessários para definir a causalidade dessas associações e sua relevância na epidemiologia. Raramente F. hepatica é considerada como um parasito de cabra no país, mas uma prevalência de 33% suscita uma interrogação sobre o papel dos caprinos na transmissão e disseminação desse trematódeo zoonótico.
- Diagnosis and isolation of <italic>Toxoplasma gondii</italic> in horses from Brazilian slaughterhouses
This study aimed to investigate anti-Toxoplasma gondii antibodies and to isolate the parasite from the brains of horses processed at slaughterhouses in Brazil. We collected brain and blood samples from 398 horses of various ages, from six Brazilian states. Serum samples were evaluated by indirect fluorescent antibody test (IFAT cut-off titre ≥ 1:64), and brains were submitted to mouse bioassay. Among the 398 horses, positivity for T. gondii was identified in 46 (11.6%) by IFAT and in 14 (3.5%) by mouse bioassay. In 12 of those 14 bioassays, mice were positive only by IFAT (cut-off titre ≥ 1:16), T. gondii being isolated in the remaining two. Using polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) analysis of 18S rDNA to differentiate among T. gondii, Neospora caninum, and Sarcocystis neurona, we found that two of the 14 brains were positive for T. gondii only. For genotyping of the two isolates and the PCR-positive brain, we performed PCR-RFLP based on 13 markers, and SAG2 all samples were Toxoplasma gondii type I. Collectively, IFAT of horse sera and mouse bioassay identified positivity in 60 (15%) of the samples. Our results show that some horses sent to slaughter in Brazil have been exposed to T. gondii. O objetivo do estudo foi investigar anticorpos anti-Toxoplasma gondii e isolar o parasita do cérebro de equídeos abatidos em matadouros-frigoríficos no Brasil. Colheram-se amostras de 398 cérebros e sangue de equídeos machos e fêmeas de idades variadas, provenientes de seis estados brasileiros. As amostras de soro foram avaliadas pelo teste de imunofluorescência indireta (IFI) para T. gondii (ponto de corte ≥ 64), e os fragmentos de cérebros foram submetidos ao bioensaio em camundongos. Por meio da IFI, 46 (11,6%) equídeos foram soropositivos. Pelo bioensaio em camundongos, 14 (3,5%) cérebros de equídeos testados foram positivos. Em doze dos bioensaios, os camundongos foram positivos somente pela IFI (ponto de corte ≥ 16) e T. gondii foi isolado nos outros dois bioensaios. A PCR-RFLP com base em 18S rDNA para diferenciar entre T. gondii, Neospora caninum, e Sarcocystis neurona foram feitas em todos os 14 cérebros e dois foram positivos apenas para T. gondii. De dois isolados positivos para T. gondii e do cérebro positivo à PCR em que realizou-se a PCR-RFLP, com base em 13 marcadores e SAG2, a genotipagem mostrou ser o T. gondii tipo I para todas as amostras. A IFI de soros de equídeos e do bioensaio em camundongos identificaram positividade em 60 (15%) amostras testadas. Os resultados mostram que alguns cavalos enviados para abate foram expostos ao T. gondii.
- Oocyst shedding by green-winged-saltator (<italic>Saltator similis</italic>) in the diagnostic of coccidiosis and <italic>Isospora similisi</italic> n. sp. (Apicomplexa: Eimeriidae)
Diurnal periodicity is a phenomenon that has been observed in coccidian of Isospora parasites of passerines, which have been eliminated great number of oocysts at dusk. The objective of this study was to evaluate the occurrence of periodicity of oocysts presence in the green-winged-saltator Saltator similis, and its use in the diagnosis of coccidiosis in wild birds in captivity. A total of 220 fecal samples were collected from birds, apprehended from illegal trading and kept in quarantine in CETAS∕IBAMA, in the morning and late afternoon, from May to November 2010. It was observed that 1.82% of the samples collected in the morning were positive, while 31.36% of samples were positive in the late afternoon. In addition, the number of oocysts shed was greater in the afternoon. Therefore, it was concluded that the sampling in the late afternoon provided greater reliability for the diagnosis of coccidiosis in green-winged-saltators. Moreover, in this study a new isosporoid coccidian parasite from the green-winged-saltator S. similis was observed and is herein described. Isospora similisi n. sp. oocysts are spheroidal to sub-spheroidal, 27.5 × 25.9 µm, with a smooth and bi-layered wall, ∼1.2 mm. Micropyle and oocyst residuum are absent, but splinter-like or comma-like granules are present. Sporocysts are ellipsoidal or slightly ovoidal, 17.4 × 12.2 mm. A stieda body and substieda body are present. The sporocyst residuum is composed of granules of different sizes. Sporozoites are vermiform with a single refractile body and a nucleus. This is the fourth description of an isosporoid coccidium infecting S. similis and the sixth description from Cardinalidae. A periodicidade diurna é um fenômeno que tem sido observado em coccídios do gênero Isospora parasitas de pássaros, os quais eliminam uma maior quantidade de oocistos ao entardecer. O objetivo deste estudo foi determinar a periodicidade de eliminação de oocistos pelas fezes no trinca-ferro-verdadeiro Saltator similis, e sua utilização no diagnóstico da coccidiose. Foram colhidas 220 amostras fecais de aves oriundas de apreensões do tráfico de animais silvestres e mantidas na quarentena do CETAS∕IBAMA, nos períodos da manhã e ao entardecer, de maio a novembro de 2010. Observou-se que 1,82% das amostras colhidas no período da manhã foram positivas, enquanto que 31,36% das amostras colhidas foram positivas ao entardecer, onde o maior número de oocistos foi observado no período da tarde. Portanto, concluiu-se que a colheita de amostras ao entardecer oferece maior confiabilidade para o diagnóstico da coccidiose. Além disso, descreve-se um novo coccídio do trinca-ferro-verdadeiro S. similis. Isospora similisi n. sp. possui oocistos esféricos a subesféricos, 27,5 × 25,9 µm, com parede dupla e lisa, ∼1,2 µm. A micrópila e o resíduo do oocisto estão ausentes, porém pequenos grânulos estão presentes. Os esporocistos são elipsóides ou levemente ovóides, 17,4 × 12,2 µm. Os corpos de Stieda e substieda estão presentes. O resíduo do esporocisto está presente e os esporozoítos possuem um corpo refrátil posterior e um núcleo. Esta é a quarta espécie isosporóide descrita de S. similis e a sexta descrição na família Cardinalidae.
- Acaricides efficiency on <italic>Rhipicephalus</italic> (<italic>Boophilus</italic>) <italic>microplus</italic> from Bahia state North-Central region
The cattle tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus is responsible for major losses in the Brazilian livestock, mainly due to reduction in cattle productive performance. Resistance development to major classes of acaricide widely used nowadays has been extensively reported, as well as the occurrence of residues from these compounds in animal products and the environment. This study aimed to evaluate the efficiency of acaricides on R. (B.) microplus collected from rural properties in the North-Central region of Bahia State. Ticks were collected in several cattle farms in the cited region, and an in vitro acaricide efficiency assay was performed based on the immersion of ticks in acaricide solutions made according to manufacturers' recommendations. The results obtained in the experiments indicated varying degrees of efficiency of the several bases studied, with the products benzofenilurea, macrocyclic lactone and fipronil showing the highest levels of efficiency, 100%, 100% and 97.34%, respectively. It was possible to conclude that, for the region studied, there are different degrees of commercial acaricides efficiency, and many present less than 95% effectiveness, value determined as acceptable by the Brazilian legislation. O carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus é responsável por grandes perdas na pecuária brasileira, principalmente devido à redução no desempenho produtivo dos animais. A resistência do parasita a diferentes classes de acaricidas tem sido amplamente relatada, bem como os problemas de ocorrência de resíduos desses compostos em produtos de origem animal e no ambiente. Esse estudo teve como objetivo avaliar a eficiência de diversos acaricidas sobre populações de R. (B.) microplus provenientes de propriedades rurais da Região Centro-Norte do Estado da Bahia, Brasil. Teleóginas ingurgitadas foram colhidas em diferentes propriedades da região e submetidas a ensaio in vitro de eficiência de acaricidas, baseado na imersão dos carrapatos em soluções de acaricidas feitas seguindo as recomendações dos fabricantes. Os resultados obtidos indicam níveis variados de eficiência das bases estudadas, com os acaricidas benzofenilureia, lactona macrocíclica e fipronil apresentando os índices mais altos de eficiência, 100%, 100% e 97.34%, respectivamente. Pode-se concluir que, para a região estudada, os acaricidas apresentam níveis diversos de eficiência, e muitos deles possuem eficácia de menos de 95%, como recomendado pela legislação brasileira.
- Health assessment of the oyster <italic>Crassostrea rhizophorae</italic> on the southern coast of Bahia, northeastern Brazil
This study investigated the health of natural stocks of the oyster Crassostrea rhizophorae on the southern coast of Bahia in northeastern Brazil, during summer and winter 2010, at three localities (sampling points) in the estuaries of the Maraú (Camamu Bay) and Graciosa rivers. A total of 180 oysters (30/sampling point/season) were examined macroscopically for the presence of pathogens and anatomical changes. The specimens were subsequently fixed in Davidson solution, processed for paraffin embedding, sectioned and stained with Harris' hematoxylin and eosin. Histological analysis revealed the presence of Rickettsia-like organisms (RLOs), Ancistrocoma, Trichodina, Sphenophrya, Nematopsis, Urastoma, Bucephalus in the sporocyst phase, a nonspecific metacercaria, and a metacestode of genus Tylocephalum. The prevalence of infection was low except for parasitism by Nematopsis sp. which also caused histopathological changes. The presence of Bucephalus sp. caused parasitic castration. These two pathogens significantly affect the health of C. rhizophorae. Este estudo investigou a saúde de ostras da espécie Crassostrea rhizophorae de estoques naturais do Litoral Sul do Estado da Bahia, Nordeste do Brasil, durante o verão e o inverno de 2010, em três pontos amostrais distribuídos nos estuários dos rios Maraú (Baía de Camamu) e Graciosa. Um total de 180 ostras (30/ponto amostral/período) foram examinadas macroscopicamente para a presença de patógenos e alterações anatômicas e posteriormente fixadas em solução de Davidson, processadas para inclusão em parafina, seccionadas e coradas com hematoxilina de Harris e eosina. A análise histológica evidenciou a presença de organismos com características similares a Rickettsia (RLOs), Ancistrocoma, Trichodina, Sphenophrya, Nematopsis, Urastoma, Bucephalus em fase esporocística, metacercária inespecífica e metacestóide de Tylocephalum. As prevalências de infecção foram baixas, com exceção do parasitismo por Nematopsis sp., o qual também causou alterações histopatológicas. A presença de Bucephalus sp. causou castração parasitária. Esses dois patógenos têm interferência significativa na saúde de C. rhizophorae.
- Endoparasitic infections in dogs from rural areas in the Lobos District, Buenos Aires province, Argentina
Dogs are definite hosts for several zoonotic helminthes and protozoan. Rural areas from the Lobos District in the northeast of Buenos Aires province, Argentina, are mainly used for livestock activity, increasing in this way the number of dogs on farms as well as the human risk of parasitic infections. The aims of this research were to evaluate the endoparasitic infections in dogs from farms in the Lobos District and analyze their zoonotic importance as well as several risk practices and habits of the rural population. Forty-two dog fecal samples obtained in 21 farms were analyzed through coproparasitological methods and coproantigen tests, which resulted in an overall parasite prevalence of 69.05% and 80.95% of the parasitized farms. The most frequent parasites were Trichuris vulpis and Eucoleus aerophila (26.19%), Echinococcus granulosus (19.05%), Uncinaria stenocephala and coccids (14.29%). The analysis of epidemiological files showed several habits of the rural population considered as risk factors associated with the presence of fecal samples parasitized and the presence of E. granulosus on the farms. It is clear that people involved with the farms studied were exposed to several helminthes that could cause serious diseases like cystic echinococcosis, which can become an important public health issue and affect the economy worldwide. Os cães são hospedeiros definitivos de vários helmintos e protozoários zoonóticos. As áreas rurais do distrito de Lobos, no nordeste da província de Buenos Aires, Argentina, destinam-se principalmente à atividade pecuária aumentando desta forma o número de cães em fazendas, bem como o risco humano de infecções parasitárias. Os objetivos desta pesquisa foram avaliar as infecções endoparasitas em cães de fazendas do distrito de Lobos e analisar a sua importância zoonótica, bem como as práticas de risco e hábitos da população rural. Quarenta e duas amostras de fezes de cães obtidos em 21 fazendas foram analisadas pelos métodos coproparasitológicos e testes de coproantígenos, resultando numa prevalência de parasitas de 69,05% e 80,95% das propriedades parasitados. Os parasitas mais frequentes foram Trichuris vulpis e Eucoleus aerophila (26,19%), Echinococcus granulosus (19,05%), Uncinaria stenocephala e coccídeos (14,29%). A análise dos arquivos epidemiológicos mostraram vários hábitos da população rural como fatores de risco associados com a presença de amostras fecais parasitadas e a presença de E. granulosus em propriedades rurais. É evidente que as pessoas das fazendas estudadas foram expostas a vários helmintos que podem causar doenças graves como equinococose cística, que constitui importante problema de saúde pública e econômico a nível mundial.
- <italic>Sphincterodiplostomum musculosum</italic> (Digenea, Diplostomidae) infecting <italic>Steindachnerina insculpta</italic> (Characiformes, Curimatidae) in the Chavantes Reservoir, Southeastern Brazil
This study aimed to report the infection by Sphincterodiplostomum musculosum metacercariae in Steindachnerina insculpta from the Chavantes Reservoir, medium Paranapanema River, municipality of Ipaussu, State of São Paulo, Brazil. Thirty specimens of S. insculpta were collected and 29 were infected with S. musculosum metacercariae (prevalence = 96.67%) in the eyes and visceral cavity. The mean intensity of infection and abundance were 96.6 ± 29.41 (7-846) and 93.3 ± 28.6 (0-846), respectively. Positive correlation was observed between parasite abundance in the eyes and standard length (rs = 0.5, p = 0.005), total weight (rs = 0.649, p = 0.0001), and condition factor (rs = 0.439, p = 0.0154). The high parasitism rates by S. musculosum metacercariae in S. insculpta can be an indicative that this fish species is highly susceptible to infection by this diplostomid, and even reflect the presence of a large abundance of the intermediate host. Moreover, S. musculosum metacercariae are reported for the first time in S. insculpta. O presente estudo tem como objetivo relatar a infecção por metacercárias de Sphincterodiplostomum musculosum em Steindachnerina insculpta provenientes do Reservatório de Chavantes, médio Paranapanema, município de Ipaussu, Estado de São Paulo, Brasil. Foram coletados 30 espécimes de S. insculpta, sendo que 29 estavam infectados por metacercárias de S. musculosum (prevalência = 96,67%) nos olhos e na cavidade visceral. A intensidade média de infecção e abundância apresentaram valores de 96,6 ± 29,41 (7-846) e 93,3 ± 28,6 (0-846), respectivamente. Foi observada correlação positiva entre a abundância dos parasitas presentes nos olhos com relação ao comprimento padrão (rs = 0.5, p = 0.005), peso (rs = 0.649, p = 0.0001) e fator de condição (rs = 0.439, p = 0.0154). As altas taxas de parasitismo de metacercárias de S. musculosum em S. insculpta podem ser um indicativo de que esta espécie de peixe é altamente susceptível à infecção por este diplostomídeo, e até mesmo refletir a presença de grande oferta do hospedeiro intermediário. Além disso, este é o primeiro relato de parasitismo por metacercárias de S. musculosum em S. insculpta.
- Serosurvey of tick-borne pathogens in dogs from urban and rural areas from Parana State, Brazil
Considering the zoonotic potential of tick-borne disease (TBD) agents and the fact that dogs may act as sentinels for human infection, the aim of the present study was to determine the seroprevalence of TBD agents and risk factors for exposure in two different canine populations from Parana State, Southern Brazil. A total of 138 dog serum samples from urban (UA) (n=68) and rural (RA) (n=70) areas were tested with commercial ELISA rapid test for Anaplasma phagocytophilum, Ehrlichia canis and Borrelia burgdorferi antibodies and indirect immunofluorescence assay (IFAT) for Babesia vogeli. An overall of 92∕138 (66.7%) dogs, being 62∕68 (91.2%) from UA and 30∕70 (42.9%) from RA, were seropositive for at least one TBD agent. From the total number of dogs, sixty-two were positive for E. canis (44.9%), 19 (13.8%) for A. phagocytophilum, and 64 (46.4%) for B. vogeli. Anti-B. burgdorferi antibodies were not detected. Dogs from UA showed a higher percentage of tick infestation (p = 0.0135) and were highly associated with seropositivity to E. canis (p = 0.000005), A. phagocytophilum (p = 0.0001), and B. vogeli (p = 0.0012). In summary, the findings indicate that dogs from urban areas present higher potential risk exposure to TBD pathogens than those from rural areas. Considerando o potencial zoonótico das doenças transmitidas por carrapatos (DTCs) e que os cães podem atuar como sentinelas para infecções em humanos, os objetivos deste estudo foram determinar a soroprevalência de agentes das DTCs e fatores de risco para a exposição em duas diferentes populações caninas do Estado do Paraná, região Sul do Brasil. Um total de 138 amostras de soro de cães de área urbana (AU) (n = 68) e rural (AR) (n = 70) foram testadas utilizando um teste de ELISA comercial rápido para detecção de anticorpos contra Anaplasma phagocytophilum, Ehrlichia canis e Borrelia burgdorferi e imunofluorescência indireta (IFI) para Babesia vogeli. Um total de 92∕138 (66,7%) cães, sendo 62∕68 (91,2%) da AU e 30∕70 (42,9%) da AR, foram soropositivos para pelo menos um agente. Do número total de amostras, sessenta e duas (44,9%) foram positivas para E. canis, 19 (13,8%) para A. phagocytophilum e 64 (46,4%) para B. canis vogeli. Anticorpos anti-B. burgdorferi não foram detectados. Os cães da AU apresentaram o maior percentual de infestação por carrapatos (p = 0,0135) e foram altamente associados com a positividade para E. canis (p = 0,000005), A. phagocytophilum (p = 0,0001) e B. vogeli (p = 0,0012). Em resumo, nossos achados indicam que cães de áreas urbanas têm um maior risco potencial de exposição a agentes patogênicos das DTCs comparados aos das áreas rurais.
- First occurrence of <italic>Quadrigyrus nickoli</italic> (Acanthocephala) in the ornamental fish <italic>Hyphessobrycon eques</italic>
The objective of this work was to report the first seasonal occurrence of the acanthocephalan Quadrigyrus nickoli Schmidt & Hugghins, 1973 (Quadrigyridae), in the “Mato Grosso” Hyphessobrycon eques (Characidae) (Steindachner, 1882), collected from the Chumucuí River, state of Pará, Brazil. The fish were collected between July 2006 (rainy season) and June 2007 (dry season) and were examined for parasites using pattern techniques. A total of 75 parasites were found in the stomach and intestine. Among 83 fish examined (50 in the dry season and 33 in the rainy season), 22 were parasitized by cystacanths of Q. nickoli. The importance of H. eques as a paratenic host for Q. nickoli is discussed. This is the first study on the biology of and infection by Q. nickoli occurring in the eastern Amazon region. O objetivo desse trabalho foi registrar a primeira ocorrência sazonal do acantocefala Quadrigyrus nickoli Schmidt & Hugghins, 1973 (Quadrigyridae) no peixe “Mato Grosso”, Hyphessobrycon eques Steindachner, 1882 (Characidae), capturados no Rio Chumucuí, região Bragantina, Pará, Brasil. Os peixes foram coletados no período de julho∕2006 a junho∕2007 e examinados com técnica padrão para detecção de parasitas. Um total de 75 parasitas foram encontrados no estômago e intestino. Dos 83 peixes capturados (50 na estação seca e 33 na chuvosa), 22 estavam parasitados por cistacantos de Quadrigyrus nickoli. No presente trabalho discute-se a importância do H. eques como hospedeiro paratênico para Quadrigyrus nickoli. Os presentes dados constituem o primeiro estudo sobre a biologia e a infecção de Q. nickoli na Amazônia oriental.
- Molecular detection of <italic>Ehrlichia canis</italic> in dogs from the Pantanal of Mato Grosso State, Brazil
The present study evaluated the presence of Ehrlichia DNA in the blood samples of 320 dogs from the urban and rural areas of the municipality of Poconé, Pantanal region, Mato Grosso state, by Polymerase Chain Reaction (PCR), targeting the ehrlichial dsb gene. Risk factors for infection in dogs were also evaluated. Forty-eight (15%, 95% CI: 11.4-19.5%) dogs were positive: 25 (15.6%, 95% CI: 10.4-22.2%) from the urban area and 23 (14.4%, 95% CI: 9.3-20.8%) from the rural area (P > 0.05). Partial DNA sequence obtained from PCR products of 18 samples from the urban area and 16 samples from the rural area were 100% identical to E. canis from Brazil and the USA. This study reports the first E. canis molecular detection in dogs from the northern Pantanal region. O presente estudo avaliou a presença de DNA de Ehrlichia spp. em 320 cães das áreas urbana e rural do município de Poconé, região do Pantanal de Mato Grosso, pela PCR visando o gene dsb. Os fatores de risco para a infecção em cães também foram avaliados. Quarenta e oito (15%, IC 95%: 11,4-19,5%) cães foram positivos, 25 (15,6%, IC 95%: 10,4-22,2%) da área urbana e 23 (14,37%, 95% CI: 9,3-20,8%) da área rural (P > 0,05). Sequências parciais de DNAs obtidos a partir de produtos da PCR de 18 amostras da área urbana e 16 da área rural foram 100% idênticas a E. canis do Brasil e EUA. Este estudo relata a primeira detecção molecular de E. canis em cães da região norte do Pantanal.
- Endogenous recipes for controlling arthropod ectoparasites of domestic poultry
This study is a contribution to the inventory of medicinal plants and other methods used in controlling external parasitic diseases of backyard poultry in the localities of Djougou and Ouaké (department of Donga, Benin). It consists of a survey undertaken from December 2010 to March 2011 through visits and interviews with 210 poultry famers. The results indicate that 13 species of medicinal plants are used in controlling ectoparasites. Annona senegalensis, Tectona grandis, Securidaca longepedunculata, Indigofera hirsuta, Lophira lanceolata, Hyptis spicigera, Steganotaenia araliacea, Oxytenanthera abyssinica, Nicotiana tabacum, Jatropha curcas, Ficus exasperata, Azadirachta indica and Parkia biglobosa are believed to treat external parasitic diseases in the area of this study. Annona senegalensis was the most frequently cited plant (18%, p < 0.05) used in remedies against external parasites in poultry. Other traditional recipes such as palm oil and ash have been reported. Este estudo é uma contribuição ao inventário de plantas curativas e outros métodos endógenos usados no combate aos ectoparasitos de pássaros de currais nas aldeias de Djougou e Ouaké (departamento do Donga, em Benin). A pesquisa foi conduzida entre dezembro de 2010 e março de 2011, durante visitas e entrevistas com 210 criadores de aves. Os resultados indicam que 13 espécies de plantas curativas são utilizadas no combate aos ectoparasitos. Annona senegalensis, Tectona grandis, Securidaca longepedunculata, Indigofera hirsuta, Lophira lanceolata, Hyptis spicigera, Steganotaenia araliacea, Oxytenanthera abyssinica, Nicotiana tabacum, Jatropha curcas, Ficus exasperata, Azadirachta indica e Parkia biglobosa, são usadas para tratar uma doença parasitária externa na área de estudo. Annona senegalensis foi a planta mais frequentemente usada (18%, p < 0.05) como medicação contra os parasitas externos das aves. Outras receitas tradicionais como o óleo de palma e a cinza tem sido comunicadas.
- Environmentally associated ticks (Acari: Ixodidae) in Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brazil
Herein, we report tick species found on wild and domestic animals and in the environment during a one-year sampling period at the Brazilian Farming Research Company beef cattle unit (Embrapa Beef Cattle), which is located within the urban area of Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brazil. From 55 wild hosts including six different species (Nasua nasua, Cebus spp., Cerdocyon thous, Myrmecophaga tridactyla, Tamandua tetradactyla and Dasyprocta aguti), 323 ticks were collected. Amblyomma ovale ticks were found solely on coatis, and Amblyomma nodosum was identified solely on anteaters. No ticks were found on capuchin monkeys. However, Amblyomma cajennense was found on all parasitized host species with the exception of capuchin monkeys. Giant anteaters displayed the highest infestation abundance, with a mean of 53 ticks∕animal. Environmental sampling yielded 166 adult A. cajennense ticks. The tick species found on domestic animals (Rhipicephalus (Boophilus) microplus, R. sanguineus, Dermacentor nitens and A. cajennense) were those typically found on these hosts in Brazil. The most prevalent tick species, A. cajennense, was found on both wild and domestic animals and was also prevalent in the environment. Thus, this tick species is the primary vector that allows pathogens to bridge wild and domestic animals in the Cerrado. Neste trabalho são descritas as espécies de carrapatos de animais selvagens e domésticos e do ambiente coletados por um ano na EMBRAPA Gado de Corte localizado na área urbana de Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brasil. Dos 55 hospedeiros selvagens de seis espécies diferentes (Nasua nasua, Cebus spp., Cerdocyon thous, Myrmecophaga tridactyla, Tamandua tetradactyla e Dasyprocta aguti) foram coletados 323 carrapatos. Amblyomma ovale foi encontrado apenas em quatis e Amblyomma nodosum apenas sobre tamanduás. Nenhum carrapato foi encontrado sobre macacos-prego. Por outro lado, Amblyomma cajennense foi encontrado em todos os hospedeiros com exceção dos macacos-pregos. A maior abundancia de infestação foi aquela em tamanduás-bandeira com média de 53 carrapatos∕animal. No ambiente foram capturados 166 carrapatos, todos da espécie A. cajennense. As espécies de carrapatos em animais domésticos (Rhipicephalus (Boophilus) microplus, Rhipicephalus sanguineus, Dermacentor nitens e A. cajennense) foram aquelas características nestes hospedeiros no Brasil. De forma geral a espécie de carrapato A. cajennense foi a mais prevalente sendo encontrada em animais domésticos e selvagens bem como no ambiente. Portanto, esta é a principal espécie de vetor a estabelecer uma ponte para bioagentes patogênicos entre animais domésticos e selvagens.
- Detection of genetic diversity of <italic>Anaplasma marginale</italic> isolates in Minas Gerais, Brazil
Bovine anaplasmosis, caused by the tick-borne rickettsia Anaplasma marginale, is endemic in tropical and subtropical regions of the world and results in economic losses in the cattle industry. Major surface proteins (MSPs) have been used as markers for the genetic characterization of A. marginale strains and demonstrate that many isolates may occur in a given geographic area. However, in Brazil, little is known about the genetic diversity of A. marginale isolates within individual herds. This study was designed to examine the genetic variation among A. marginale infecting calves in a farm in the south of Minas Gerais State, Brazil. Blood samples collected from 100 calves were used to prepare Giemsastained smears that were microscopically examined for the presence of A. marginale. From each blood sample, DNA was extracted and analyzed by a polymerase chain reaction (PCR), followed by sequencing to determine diversity among the isolates. Examination of blood smears showed that 48% of the calves were infected with A. marginale, while the real-time PCR detected 70.2% positivity. Congenital infections were found in four calves. The microsatellite and tandem repeat analyses showed high genetic diversity among the isolates. A anaplasmose bovina, causada pela rickettsia Anaplasma marginale e transmitida por carrapatos, é endêmica em regiões tropicais e subtropicais no mundo e causa grandes perdas econômicas na industria de bovinos. Proteínas principais de superfície (MSPs) foram usados como marcadores para a caracterização genética de amostras de A. marginale, demonstrando que diferentes isolados podem ocorrer numa certa região geográfica. Porém, no Brasil pouco se sabe sobre a variedade genética de isolados de A. marginale em rebanhos individuais. Este estudo teve como objetivo investigar a ocorrência de variação genética entre bezerros infectados com A. marginale numa fazenda do sul de Minas Gerais, Brasil. Amostras de sangue coletadas de 100 bezerros foram utilizadas para o preparo de esfregaços sanguíneos, corados pelo Giemsa, para detecção da infecção por A. marginale. Amostras de DNA extraídas de cada amostra foram analisadas através de PCR seguido de sequenciamento. O exame dos esfregaços demonstrou que 48% dos bezerros estavam infectados com A. marginale, enquanto que o PCR detectou 70,2% de positividade. Infecção congênita foi detectada em quatro bezerros. As análises de microsatélites e ‘tandem repeats' comprovaram uma grande diversidade genética entre os isolados.
- Mechanisms of pyrethroid resistance in <italic>Haematobia irritans</italic> (Muscidae) from Mato Grosso do Sul state, Brazil
Horn fly resistance to pyrethroid insecticides occurs throughout Brazil, but knowledge about the involved mechanisms is still in an incipient stage. This survey was aimed to identify the mechanisms of horn fly resistance to cypermethrin in Mato Grosso do Sul state, Brazil. Impregnated filter paper bioassays using cypermethrin, synergized or not with piperonyl butoxide (PBO) and triphenyl phosphate (TPP), were conducted from March 2004 to June 2005 in horn fly populations (n = 33) from all over the state. All populations were highly resistant to cypermethrin, with resistance factors (RF) ranging from 89.4 to 1,020.6. Polymerase chain reaction (PCR) assays to detect the knockdown resistance (kdr) mutation also were performed in 16 samples. The kdr mutation was found in 75% of the tested populations, mostly with relatively low frequencies (<20%), and was absent in some highly resistant populations. Addition of TPP did not significantly reduce the LC50 in any population. However, PBO reduced LC50s above 40-fold in all tested populations, resulting in RFs ≤ 10 in most cases. Horn fly resistance to cypermethrin is widespread in the state, being primarily caused by an enhanced activity of P450 mono-oxygenases and secondarily by reduced target site sensitivity. Resistência da mosca-dos-chifres a inseticidas piretróides ocorre em todo o país, entretanto, o conhecimento sobre os mecanismos envolvidos é ainda incipiente. Este estudo objetivou identificar os mecanismos de resistência desta mosca à cipermetrina em Mato Grosso do Sul. Bioensaios utilizando papéis impregnados com cipermetrina, isoladamente ou sinergizada por butóxido de piperonila (PBO) ou trifenil fosfato (TPP), foram realizados de março∕2004 a junho∕2005 em 33 populações. Todas as populações apresentaram elevada resistência à cipermetrina, com fatores de resistência (FR) variando de 89,4 a 1.020,6. Ensaios de reação em cadeia da polimerase (PCR) visando a detecção de kdr (“knockdown resistance”) foram realizados em 16 amostras. A mutação kdr foi detectada em 75% das populações, geralmente em baixas frequências (<20%) e ausente em algumas populações resistentes. A adição de TPP não reduziu significativamente a CL50 em nenhuma população. Entretanto, o PBO reduziu em mais de 40 vezes a CL50 de todas as populações testadas, resultando em FR ≤ 10 na maioria dos casos. Resistência da mosca-dos-chifres à cipermetrina encontra-se disseminada no estado, sendo causada primariamente por um aumento da atividade de P450 mono-oxigenases e secundariamente pela redução da sensibilidade do sítio de ação do inseticida.
- Proteolytic action of the crude extract of <italic>Duddingtonia flagrans</italic> on cyathostomins (Nematoda: Cyathostominae) in coprocultures
The objective of this study was to examine the action of the crude extract of Duddingtonia flagrans (isolates AC001 and CG722) on infective larvae (L3) of cyathostomins in coprocultures and to confirm its proteolytic activity by means of a zymogram. The following groups were formed in coprocultures: Group 1: 10 mL of crude extract of D. flagrans (AC001); group 2: 10 mL of crude extract of AC001 with 10 mM of Ca2+; group 3: 10 mL of crude extract of D. flagrans (CG722); group 4: 10 mL of crude extract of CG722 with 10 mM of Ca2+; and group 5: control group (distilled water). The third-stage larvae (L3) were obtained after eight days. The crude extract of D. flagrans was effective in reducing the number of L3, with the following percentage reductions: group 1, 49.5%; group 2, 52.5%; group 3, 36.8%; and group 4, 57.7%; in relation to the control group (p > 0.05). The proteolytic activity of the crude extract was confirmed through the zymogram. The results from this study confirmed that the crude extract of the fungus D. flagrans could be used for controlling cyathostomin L3, and suggested that at least one protease of approximately 38 kDa was present. O objetivo deste trabalho foi estudar a ação do extrato bruto de Duddingtonia flagrans (isolados AC001 e CG722) sobre larvas infectantes (L3) de ciatostomíneos em coproculturas e confirmar a sua atividade proteolítica por meio de um zimograma. Foram formados os seguintes grupos em coproculturas: grupo 1: 10 mL de extrato bruto de D. flagrans (AC001); grupo 2: 10 mL de extrato bruto de AC001 com íons Ca2+ 10 Mm; grupo 3: 10 mL de extrato bruto de D. flagrans (CG722); grupo 4: 10 mL de extrato bruto de CG722 com íons Ca2+ 10 Mm; e grupo 5 como controle (água destilada), obtendo-se as L3 ao final de 8 dias. O extrato bruto de D. flagrans foi eficiente na redução do número de L3 com os seguintes percentuais de redução: grupo 1 (49,5%); grupo 2 (52,5%); grupo 3 (36,8%) e grupo 4 (57,7%) em relação ao grupo controle (p > 0,05). Confirmou-se a atividade proteolítica por meio do zimograma. Os resultados do presente trabalho confirmam a utilização do extrato bruto do fungo D. flagrans no controle de L3 de ciatostomíneos e sugere a presença de pelo menos uma protease de aproximadamente 38 kDa.
- First report of interaction of nematophagous fungi on <italic>Libyostrongylus douglassii</italic> (Nematoda: Trichostrongylidae)
Libyostrongylus douglassii is a gastrointestinal nematode parasite of ostriches that can cause up to 50% mortality in young birds. The objective of this study was to compare the predatory capacity of two isolates of the predatory fungi Duddingtonia flagrans (AC001 and CG722 isolates) and one of Arthrobotrys cladodes (CG719) on infective larvae (L3) of L. douglassii under laboratory conditions, in 2% water-agar medium. The results showed that the fungi tested were effective in preying upon the L3 of L. douglassii (P < 0.05), compared with the control group. However, there was no difference in predatory capacity between the fungi tested (P > 0.05) during the seven days of experimental testing. In comparison with the control, without fungus, there were significant decreases (P < 0.05) of 85.2% (AC001), 81.2% (CG722) and 89.2% (CG719) in the average numbers of L3 of L. douglassii recovered from treatments with the isolates tested. In the present study, the three isolates of the predatory fungi D. flagrans (AC001 and CG722) and A. cladodes (CG719) were efficient at in vitro destruction of the L3 of L. douglassii. Libyostrongylus douglassii é um nematóide parasito gastrintestinal de avestruzes que pode causar até 50% de mortalidade em aves jovens. O objetivo deste trabalho foi comparar a capacidade predatória de dois isolados de fungos predadores Duddingtonia flagrans (isolados AC001 e CG722) e um Arthrobotrys cladodes (CG719) sobre larvas infectantes (L3) de L. douglassii em condições laboratoriais, em meio ágar–água 2%. Os resultados demonstraram que os fungos testados foram eficientes em predar as L3 de L. douglassii (P < 0,05) em relação ao grupo controle. Contudo, não foi observada nenhuma diferença na capacidade predatória entre os fungos testados (P > 0,05) durante os sete dias do ensaio experimental. Em comparação ao controle, sem fungo, houve uma redução significativa (P < 0,05) de 85,2% (AC001); 81,2% (CG722) e 89,2% (C719) na média de L3 recuperadas nas placas do grupo tratado com os isolados testados. No presente trabalho, os três isolados de fungos predadores D. flagrans (AC001 e CG722) e A. cladodes (CG719) foram eficientes na destruição in vitro das L3 de L. douglassii.
- New host records of <italic>Ixodes luciae</italic> (Acari: Ixodidae) in the State of Para, Brazil
The aim of this paper is to record new hosts for Ixodes luciae Sénevet in the State of Para, Brazil, and present a case of malformation (teratogeny) in a nymph of this species. The new host records are Marmosa murina (parasitized by females) and Philander opossum (parasitized by nymphs). One of these nymphs showed malformation in the posterior margin of the opisthosoma resulting in a heart shaped posterior end. O objetivo deste trabalho foi registrar novos hospedeiros para Ixodes luciae Sénevet no estado do Pará, Brasil, e um caso de malformação em uma ninfa dessa espécie de carrapato. Os novos hospedeiros são Marmosa murina (parasitado por fêmeas) e Philander opossum (parasitado por ninfas). Uma dessas ninfas apresentou uma malformação na parte posterior do opistossoma em forma de coração.
- First report of acariasis by <italic>Caparinia tripilis</italic> in African hedgehogs, (<italic>Atelerix albiventris</italic>), in Costa Rica
The African hedgehog is one of the newly imported exotic pets which have been observed with increasing regularity in veterinary clinics in Costa Rica. Despite their popularity, information about their diseases is scarce. Within skin diseases of hedgehogs, mange caused by Caparinia spp. is a common diagnosis in other countries. Two adult African hedgehogs, one male and one female, were brought to a private clinic in Heredia, Costa Rica, with chronic pruritic dermatitis, scabs, nearly complete loss of spines, lethargy, dehydration, and weight loss. During physical exam, deposits of dry seborrhea were taken and processed for diagnosis. Microscopic examination revealed psoroptid mites identified as Caparinia tripilis. This is the first report of the presence of Caparinia tripilis in Costa Rica and, to the authors' knowledge, the rest of Central America. O ouriço africano é um dos animais de estimação exótico, recém-importado que tem sido observado com maior regularidade nas clínicas veterinárias da Costa Rica. Apesar da sua popularidade, informações sobre suas doenças são escassas. Dentre as doenças de pele de ouriços, a sarna causada por Caparinia spp. é um diagnóstico comum nos outros países. Dois adultos ouriços africanos, um macho e uma fêmea, foram levados para uma clínica particular, em Heredia, Costa Rica, com a dermatite pruriginosa crônica, crostas, perda quase completa de espinhos, letargia, desidratação e perda de peso. Ao exame físico, os depósitos de seborreia seca foram retirados e processados para o diagnóstico. O exame microscópico revelou ácaros (psoroptidae) identificados como Caparinia tripilis. Esse é o primeiro relato da presença de Caparinia tripilis na Costa Rica e, para conhecimento dos autores, o resto da América Central.
- Noteworthy records of <italic>Ixodes schulzei</italic> (Acari: Ixodidae) on rodents from the State of Parana, southern Brazil
Ixodes schulzei Aragão & Fonseca is an endemic tick to Brazil and has already been reported in the northern (State of Rondonia), southeastern (States of Minas Gerais, Rio de Janeiro and Sao Paulo) and southern (State of Santa Catarina) regions, always found in association with the water rat Nectomys squamipes (Brandt). This communication records the first occurrence of this tick species in the State of Parana, southern region of Brazil, and it constitutes its first report on Akodon montensis (Thomas) and Oryzomys russatus (Wagner) hosts. Ixodes schulzei Aragão & Fonseca é um carrapato endêmico do Brasil e já foi relatado nas regiões Norte (estado de Rondônia), Sudeste (estados de Minas Gerais, Rio de Janeiro e São Paulo) e Sul (estado de Santa Catarina), tendo sido encontrado sempre em associação com o rato d'água Nectomys squamipes (Brandt). Esta comunicação registra a primeira ocorrência dessa espécie de carrapato no estado do Paraná, região Sul do Brasil e constitui o primeiro relato de Akodon montensis (Thomas) e Oryzomys russatus (Wagner) como hospedeiros.
- Seroprevalence rates of antibodies against <italic>Leishmania infantum</italic> and other protozoan and rickettsial parasites in dogs
Canine visceral leishmaniasis (CVL) is caused by the protozoan Leishmania infantum, which infects dogs and humans in many regions of Brazil. The present study involved an indirect fluorescent antibody test (IFAT) to analyze L. infantum, Ehrlichia spp., Babesia canis, Toxoplasma gondii and Neospora caninum infection rates in serum samples from 93 dogs in a rural settlement in Ilha Solteira, SP, Brazil. The seroprevalence rates of anti-L. infantum, anti-Ehrlichia, anti-B. canis, anti-T. gondii and anti-N. caninum antibodies were 37.6%, 75.3%, 72%, 47.3% and 6.4%, respectively. In addition to IFAT, direct microscopic examination of popliteal lymph node aspirates revealed 26.9% of CVL positive dogs. Serological tests revealed that 17.2% of the dogs were seropositive for a single parasite, 29% for two parasites, 33% for three, 16.1% for four, and 1.1% for five parasites, while 3.2% were seronegative for five parasites. The presence of antibodies against these parasites in serum samples from dogs confirmed their exposure to these parasites in this rural area. Because of the potential zoonotic risk of these diseases, mainly leishmaniasis, ehrlichiosis and toxoplasmosis, special attention should focus on programs for the improvement of diagnostic assays and control measures against these parasites. Leishmaniose Visceral Canina (LVC) é causada pelo protozoário Leishmania infantum, podendo infectar cães e humanos em várias regiões do Brasil. O presente estudo teve por objetivo realizar a reação de imunofluorescência indireta (RIFI) para analisar os índices de infecção parasitária para L. infantum, Ehrlichia spp., Babesia canis, Toxoplasma gondii e Neospora caninum, em 93 amostras de soro de cães de um assentamento rural no município de Ilha Solteira, SP, Brasil. A taxa de soroprevalência de cães com anticorpos anti-L. infantum, anti-Ehrlichia, anti-B. canis, anti-T. gondii e anti-N. caninum foi de 37,6%, 75,3%, 72%, 47,3% e 6,4%, respectivamente. Pelo exame microscópico direto dos parasitas nos esfregaços de aspirados de linfonodos poplíteos dos cães, a positividade para LVC foi de 26,9%. Pelos exames sorológicos, 17,2% dos cães estavam positivos com um único parasita, 29% com dois, 33% com três, 16,1% com quatro e 1,1% com cinco parasitas. Além disso, 3,2% eram soronegativos para todos os cinco agentes parasitários. A presença de anticorpos aos parasitos em amostras sorológicas confirmam a exposição dos cães às doenças parasitárias nesse assentamento rural. Devido ao potencial risco zoonótico destas doenças, principalmente leishmaniose, erliquiose e toxoplasmose, atenção especial deve ser dada aos programas que objetivam o aprimoramento de testes diagnósticos e de medidas de controle dessas parasitoses.
- First occurrence of <italic>Amblyomma ovale</italic> in the State of Rio Grande do Norte, Brazil
This study aims to report the occurrence of parasitism by Amblyomma ovale (Koch, 1844) in dogs in the municipality of Apodi, Rio Grande do Norte, Brazil. Specimens were identified as being one female and two males of A. ovale, besides; the animal was infested by five females of Rhipicephalus (Boophilus) microplus and seven females and three males of R. sanguineus. The finding of A. ovale confirms results in the literature that these ticks, reported in several species of wild carnivores, can also infect dogs in Brazil. The distribution of this tick species in several Brazilian states has already been confirmed, but this is the first report in the State of Rio Grande do Norte. This finding highlights the risk of the carrying of emerging and re-emerging pathogens to peridomestic hosts are as, either because of the frequency of these ticks in wild environments or the presence of infected wild animals near peridomestic environments, exposing domestic dogs to parasitism by A. ovale ticks and, therefore, to agents potentially carried by this ectoparasite. O presente estudo objetiva comunicar a ocorrência do parasitismo por Amblyomma ovale (Koch, 1844) em cão, no município de Apodi, Rio Grande do Norte, Brasil. Os exemplares foram identificados como sendo uma fêmea e dois machos de A. ovale, além destes, o animal estava parasitado por cinco fêmeas de Rhipicephalus (Boophilus) microplus, sete fêmeas e três machos de R. sanguineus. O encontro de A. ovale confirma os resultados da literatura de que esses carrapatos, relatados em várias espécies de carnívoros silvestres, também podem infestar cães no Brasil. Este carrapato tem sua distribuição confirmada em vários estados brasileiros, sendo este o primeiro relato no Estado do Rio Grande do Norte. Este achado alerta para o risco do carreamento de patógenos emergentes e re-emergentes para regiões peridomiciliares, seja devido a frequência destes carrapatos em ambientes silvestres ou da presença de animais silvestres parasitados próximos a ambientes peridomiciliares, expondo cães domésticos ao parasitismo por carrapatos A. ovale e, consequentemente, a agentes potencialmente veiculados por este ectoparasito.
- Predatory activity of chlamydospores of the fungus <italic>Pochonia chlamydosporia</italic> on <italic>Toxocara canis</italic> eggs under laboratory conditions
The objective of this study was to use chlamydospores of the fungus Pochonia chlamydosporia (isolates VC1 and VC4) against Toxocara canis eggs in a 15-day in vitro assay. One thousand T. canis eggs were placed in Petri dishes containing 2% water agar medium with different concentrations of chlamydospores (1,000, 10,000 or 100,000) of each fungal isolate of P. chlamydosporia (treated groups) and 1,000 eggs in Petri dishes without fungus (control group). Egg counts were performed to determine the ovicidal activity, which was classified as three effect levels: type 1, type 2 and type 3. Significant differences (P < 0.01) in egg destruction were found in comparison with the control group. The highest percentage of egg destruction was found in plates containing 100,000 chlamydospores (68.5% for VC1 and 70.5% for VC4). Chlamydospores of P. chlamydosporia were effective in destroying T. canis eggs and may contribute in the future towards combating the eggs of this parasite. O objetivo do trabalho foi utilizar clamidósporos do fungo Pochonia chlamydosporia (isolados VC1 e VC4) na destruição de ovos de Toxocara canis, num ensaio in vitro, realizado no intervalo de 15 dias. Em cada placa de Petri com ágar-água 2% foram vertidos 1.000 ovos de T. canis em 1.000, 10.000 ou 100.000 clamidósporos de cada isolado do fungo (grupos tratados). Foram realizadas as contagens para verificar a atividade ovicida, classificada em três níveis de efeito: tipo 1, tipo 2 e tipo 3. Os resultados demonstraram que houve diferença significativa (P < 0,01) na destruição dos ovos em relação aos ovos observados nas placas do grupo controle. O maior percentual de ovos destruídos foi observado nas placas contendo 100.000 clamidósporos (68,5% para VC1 e 70,5% para VC4). Clamidósporos do fungo P. chlamydosporia foram efetivos na destruição dos ovos de T. canis podendo contribuir no futuro para o combate aos ovos deste parasito.
- Frequency of geohelminths in public squares in Pelotas, RS, Brazil
The frequency of parasitic contamination of public areas in the municipality of Pelotas, state of Rio Grande do Sul, Brazil, was studied between June 2010 and May 2011, when soil samples were collected from eight city squares. Out of 400 samples submitted to centrifugal floatation technique in solution of sodium dichromate with density of 1.35, 176 (44%) proved positive for at least one parasite; 29 (16.5%) samples were multi-infested. The results showed that there was a significant soil contamination rate in all the parks included in the study. The positivity rate was higher for hookworms eggs (13.5%) and Toxocara eggs (8.8%); Trichuris, Ascaris and Capillaria eggs were also detected. This study shows the risks to which the population is exposed in relation to zoonotic geohelminths, and suggests that sanitation and health education measures should be implemented in the municipality. A frequência de contaminação parasitária de áreas públicas de Pelotas, Rio Grande do Sul, Brasil, foi avaliada entre junho de 2010 e maio de 2011, com coletas mensais de amostras de solo de oito praças. Das 400 amostras submetidas à técnica de centrífugo-flutuação em solução de dicromato de sódio com densidade de 1,35, 176 (44%) apresentaram pelo menos uma forma parasitária e, das amostras positivas, 29 (16,5%) estavam poliparasitadas. Os resultados demonstraram relevante índice de contaminação do solo em todas as praças avaliadas, com maiores índices de positividade para ovos de ancilostomídeos (13,5%) e ovos de Toxocara (8,8%), sendo também identificados ovos de Trichuris, Ascaris e Capillaria. O estudo demonstrou a contaminação ambiental de praças públicas e os riscos a que a população está exposta em relação a doenças causadas por geoparasitos zoonóticos e sugere que medidas de saneamento e educação em saúde devem ser implementadas no município.
- Detection of anti-<italic>Toxoplasma gondii</italic> antibodies in carthorses in the metropolitan region of Curitiba, Paraná, Brazil
Toxoplasma gondii, the agent for toxoplasmosis, has worldwide distribution. Horses normally play a secondary role in its life cycle, but movement around urban areas, feeding on grass and the increasing use of carthorses for gathering recyclable material in some urban areas of Brazil may increase their exposure to T. gondii infection. The aim of the present study was to investigate the frequency of anti-T. gondii antibodies in carthorses in the metropolitan region of Curitiba, PR. IgG antibodies against T. gondii were detected using the indirect fluorescence antibody test (IFAT) (titers ≥ 64). Seventeen (17.0%) of the 100 horses sampled were seropositive. There were no statistical differences in relation to sex (p = 0.28) or age (p = 0.15). Our findings suggest that carthorses are exposed to T. gondii infections and that no associations with age or sex exist. Toxoplasma gondii, agente da toxoplasmose, tem distribuição mundial. Geralmente cavalos desempenham papel secundário no ciclo de vida do T. gondii. Entretanto, a circulação em meio urbano, a alimentação com gramíneas e o aumento no uso de cavalos carroceiros para recolhimento de material reciclável em algumas áreas urbanas do Brasil podem aumentar a exposição desses cavalos ao T. gondii. O objetivo deste estudo foi investigar a frequência de anticorpos anti-T. gondii em cavalos carroceiros da região metropolitana de Curitiba, PR. Os anticorpos da classe IgG contra T. gondii foram detectados pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI) (títulos ≥ 64). Dezessete (17%) dos 100 cavalos avaliados foram positivos e não houve diferença entre sexos (p = 0,28) ou idade (p = 0,15). Esses achados sugerem que cavalos carroceiros estão expostos a infecções por T. gondii, não existindo associação com a idade ou o sexo dos animais.
- First report of <italic>Trypanosoma cruzi</italic> infection in naturally infected dogs from southern Bahia, Brazil
In order to verify the Trypanosoma cruzi infection in domestic domiciled dogs in a rural endemic area from the south region of the State of Bahia, Polymerase Chain Reaction (PCR) were performed using S35 and S36 primers in 272 dogs living in the district of Vila Operaria, in the municipality of Buerarema. All animals were clinically evaluated; 2.5 mL of blood were collected through venipuncture for the performance of molecular tests. None of these animals showed clinical signs of the illness and only two were identified with the DNA parasite. This result is the first report of natural infection by T. cruzi in domestic dogs in southern Bahia. Com o objetivo de verificar a infecção por Trypanosoma cruzi em cães domésticos domiciliados em área rural e endêmica do sul da Bahia, foi realizada a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), utilizando-se os iniciadores S35 e S36 em 272 cães domiciliados no distrito da Vila Operária, cidade de Buerarema. Todos os animais foram avaliados clinicamente e, posteriormente, foram coletados 2,5 mL de sangue por punção venosa para realização do diagnóstico molecular. Nenhum dos animais apresentou manifestação clínica da doença e, em apenas dois foram identificados DNA do parasito. Esse resultado é o primeiro relato de infecção natural por T. cruzi em cães domésticos no sul baiano.
- Acaricidal efficacy of topical formulation of fipronil in naturally infested dogs in Amazonic region, Brazil
This study was conducted to show the effectiveness of a novel formulation of fipronil in a spot-on formulation for the therapeutic and preventive control of Rhipicephalus sanguineus in naturally infested dogs. Ticks on all dogs were counted at the moment of treatment and weekly after treatment (therapeutic efficacy) or infestation (preventive efficacy). The profile of the therapeutic efficacy for Rhipicephalus sanguineus suggested that the formulation was able to control the Ixodid species for at least 42 days after the treatment. Este estudo teve como objetivo avaliar a eficácia de uma nova formulação “spot-on” à base de fipronil na terapêutica e prevenção do parasitismo por Rhipicephalus sanguineus em cães naturalmente infestados. Foi realizada contagem dos carrapatos no momento da aplicação do produto e semanalmente após o tratamento (eficácia terapêutica), bem como avaliando sua reinfestação (eficácia preventiva). Perfis terapêuticos e preventivos sugerem que a formulação controla o parasitismo por R. sanguineus em cães por pelo menos 42 dias após o tratamento.
- <b>First record of <i>Parakosa flexipes</i> (Acari: Chirodiscidae) parasitizing a free-tailed bat (Chiroptera: Molossidae) in Brazil</b>
The present study reports the occurrence of Parakosa flexipes (Pinichpongse) (Chirodiscidae) for the first time in Brazil, along with its infection sites on Molossus rufus E. Geoffroy. Thirty-eight bats were caught using mist nets that were placed near a house at the Mars Center for Cocoa Science in the state of Bahia, of which 14 (37%) were parasitized by P. flexipes. Parakosa flexipes was observed parasitizing M. rufus on hairs that were evidently longer than others distributed over the bat's body, where up to three parasites could be spotted on a single hair. O presente estudo registra a ocorrência de Parakosa flexipes (Pinichpongse) pela primeira vez no Brasil, bem como seus sítios de infecção em Molossus rufus E. Geoffroy. Foram capturados 38 morcegos com redes-de-neblina, dispostas próximas a uma residência da "Mars Center for Cocoa Science" no Sul da Bahia, dos quais 14 (37%) estavam parasitados por P. flexipes. Parakosa flexipes foi observada parasitando M. rufus em pelos evidentemente maiores que os demais distribuídos pelo corpo do morcego, onde se pôde observar até três parasitos em um único pelo.
- <b>
<i>Amblyomma nodosum</i> (Acari: Ixodidae) parasitizing a domestic dog in Colatina, Espírito Santo, Brazil</b>
On 27 Jan 2011 an adult Amblyomma nodosum tick was found attached to a domestic dog from the municipality of Colatina, state of Espírito Santo, Brazil. This is the first report of this tick species in this state and the second time it has been reported parasitizing a domestic dog in the country. For the time being, this finding should be regarded as incidental. However, more in-depth research into the hosts and ecology of A. nodosum is needed, since it has been associated to infectious agents that are potentially pathogenic for humans. Em 17 de janeiro de 2011 um carrapato adulto de Amblyomma nodosum foi encontrado parasitando um cão doméstico no município de Colatina, Espírito Santo, Brasil. Esta é a primeira vez que esta espécie de carrapato foi descrita no Estado e pela segunda vez no país parasitando um cão doméstico. Este achado por ora deve ser considerado fortuito. Entretanto, a busca por informações adicionais sobre hospedeiros e ecologia do A. nodosum é recomendada uma vez que este parasito já foi associado a agente infeccioso potencialmente patogênico para seres humanos.
- <b>First record of <i>Tuxophorus caligodes</i> (Siphonostomatoida, Tuxophoridae) in sea-farmed cobia, <i>Rachycentron canadum</i>, in Brazil</b>
The cobia is the only representative of the Rachycentridae family and, because of its zootechnical qualities, production of this fish has been implemented in several countries, such as the United States, Mexico and Brazil. Tuxophorus caligodes is a widespread parasite of marine fish worldwide. For the present report, 15 juvenile cobias were collected from net cages on a fish farm in Ilhabela, state of São Paulo, Brazil, in the winter of 2011. The fish were sacrificed by means of cerebral concussion, and then weighed (280 ± 70.5 g) and measured (27 ± 1.97 cm). After external examination under a stereomicroscope, ectoparasites present on the body surface were collected, fixed and processed for identification. Out of the 15 fish examined, two were parasitized with Tuxophorus caligodes, thus indicating a prevalence of 13.3%. This is the first report of Tuxophorus caligodes in cobias in Brazil. O cobia é o único representante da família Rachycentridae e, devido às suas qualidades zootécnicas, a produção desse peixe tem sido implementada em vários países, tais como os Estados Unidos, México e Brasil. Tuxophorus caligodes é um parasito de peixes marinhos amplamente distribuído no mundo. Para o presente relato, 15 juvenis de cobias foram coletados de tanques-rede, em uma fazenda marinha em Ilhabela, Estado de São Paulo, Brasil, no inverno de 2011. Os peixes foram sujeitos à eutanásia por meio de concussão cerebral, pesados (280 ± 70,5 g) e medidos (27 ± 1,97 cm). Após exame externo sob um estereomicroscópio, os ectoparasitos presentes na superfície do corpo foram coletados, fixados e processados para identificação. Dos 15 peixes examinados, dois apresentavam-se parasitados indicando a prevalência de 13,3%. Esse é o primeiro relato de Tuxophorus caligodes em cobias no Brasil.
- <b>Serological survey on <i>Ehrlichia</i> sp. among dogs in the central region of Rio Grande do Sul</b>
A serological survey on Ehrlichia canis was conducted among dogs in the central area of the state of Rio Grande do Sul, where the tick Rhipicephalus sanguineus is a common parasite of dogs. Out of a total of 316 dogs attended at the veterinary teaching hospital in the municipality of Santa Maria, only 14 (4.43%) reacted positively to E. canis antigens in the indirect immunofluorescence assay, with the following endpoint titers: 80 (three dogs), 160 (five), 320 (four), 640 (one) and 1280 (one). Like in previous studies in other regions of the state of Rio Grande do Sul, only a very small portion of the dogs in Santa Maria presented antibodies reactive to E. canis, even though canine infestations due to R. sanguineus are very common in this study region. These results contrast with other regions of Brazil, where E. canis is endemic among canine populations, with seropositivity values generally higher than 30%. Genetic differences among the R. sanguineus populations in South America might be implicated in these contrasting results. Foi realizada uma pesquisa sorológica para Ehrlichia canis, em cães, na região central do estado do Rio Grande do Sul, onde o carrapato Rhipicephalus sanguineus é um parasita comum em cães. De um total de 316 cães atendidos no Hospital Veterinário Universitário no Município de Santa Maria, somente 14 (4,43%) reagiram positivamente para o antígeno de E. canis pela reação de imunofluorescência indireta, com os seguintes títulos finais: 80 (3 cães), 160 (5), 320 (4), 640 (1) e 1.280 (1). Semelhante aos estudos anteriores em outras regiões do estado do Rio Grande do Sul, apenas uma pequena parcela dos cães de Santa Maria apresentaram anticorpos reativos para E. canis, mesmo que as infestações caninas por R. sanguineus sejam muito comuns na região de estudo. Esses resultados contrastam com outras regiões do Brasil, nas quais E. canis é endêmica entre a população canina, com valores de soropositividade geralmente superiores a 30%. Diferenças genéticas entre as populações de R. sanguineus, na América do Sul, poderiam estar envolvidas nesses resultados contrastantes.
- <b>Clinical and hematological findings in <i>Leishmania braziliensis</i>-infected dogs from Pernambuco, Brazil</b>
Canine cutaneous leishmaniasis by Leishmania braziliensis is a neglected, but widespread disease of dogs in South America. This paper describes clinical and hematological alterations in 17 L. braziliensis-infected dogs from Brazil. The most common hematological findings were thrombocytopenia (82.4%), anemia (70.6%), low packed cell volume (52.9%) and eosinophilia (41.2%). Twelve (70.6%) dogs displayed at least one evident physical alteration; 11 dogs (64.7%) presented skin lesions, four (23.5%) had weight loss and two (11.8%) onychogryphosis. L. braziliensis-infected dogs present clinical and hematological signs often observed in dogs infected by other pathogens. This indicates that veterinarians and public health workers should not consider the presence of non-specific clinical signs as diagnostic criteria for visceral leishmaniasis in dogs living endemic areas to avoid misdiagnosis and subsequent elimination of dogs infected by L. braziliensis. A leishmaniose cutânea canina causada por Leishmania braziliensis é uma doença negligenciada, mas disseminada entre cães na America do Sul. Este artigo descreve alterações clínicas e hematológicas em 17 cães infectados por L. braziliensis do Brasil. As alterações hematológicas mais comuns foram trombocitopenia (82,4%), anemia (70,6%), baixo valor de hematócrito (52,9%) e eosinofilia (41,2%). Doze (70,6%) cães apresentaram pelo menos uma alteração física; 11 (64,7%) apresentaram lesões cutâneas, quatro (23,5%) perda de peso e dois (11,8%) onicogrifose. Cães infectados por L. braziliensis apresentaram alterações clínicas e hematológicas inespecíficas que são comumente observadas em cães infectados por outros patógenos. Isso indica que veterinários e profissionais de saúde pública não deveriam considerar a presença de tais sinais clínicos como critério de diagnóstico para leishmaniose visceral em cães, em áreas endêmicas, no intuito de evitar um diagnóstico equivocado e a subsequente eliminação de cães infectados por L. braziliensis.
- <b>New records of Muscidae (Diptera) in Campo Grande, MS, Brazil</b>
Synanthropic flies outstanding beside other flies due their relative abundance close to domestic animals and human population, to which they are able to cause myiasis or transmit pathogenic agents. As they're necrophagous they act as corpse decomposers and are useful in the forensic entomology in the post mortem interval determination. This study aimed to know flies diversity and abundance in Campo Grande, State of Mato Grosso do Sul. Captures were made weekly, utilizing three traps baited with decaying fish meat, from June of 2008 to May of 2009 in a remainder ciliary forest of the Embrapa's Cattle Beef Experimental Farm. The dipterans families that were considered and respectively number of collected specimens were: Calliphoridae (105,334); Muscidae (27,999); Sarcophagidae (21,083); Fanniidae (17,759) and Mesembrinellidae (305), totalizing 172,480 dipterous. To the local known species some Muscidae were increased as follows: Neomuscina atincticosta, Pseudoptilolepis elbida, Polietina orbitalis, Polietina flavithorax, Scutellomusca scutellaris, Graphomya analis and Morellia couriae. As moscas sinantrópicas se destacam pelo fato de serem relativamente abundantes junto à população humana e animais domésticos, podendo causar a estes miíases ou transmitir agentes patogênicos. Por serem necrófagas, atuam na decomposição de cadáveres e são úteis para a entomologia forense como indicadores na determinação do intervalo post mortem - IPM. Este trabalho visou conhecer a diversidade e a abundância das espécies em Campo Grande, Estado de Mato Grosso do Sul. As capturas foram realizadas semanalmente, com três armadilhas, utilizando isca de peixe deteriorado, durante o período de junho de 2008 a maio de 2009 em mata ciliar remanescente na fazenda experimental da Embrapa Gado de Corte. Foram consideradas as seguintes famílias de dípteros, seguidas pelo número de exemplares obtidos: Calliphoridae (105.334); Muscidae (27.999); Sarcophagidae (21.083); Fanniidae (17.759) e Mesembrinellidae (305), totalizando 172.480 dípteros. Foram acrescentadas às espécies de Muscidae já notificadas para o local deste estudo: Neomuscina atincticosta, Pseudoptilolepis elbida, Polietina orbitalis, Polietina flavithorax, Scutellomusca scutellaris, Graphomya analis e Morellia couriae.
- <b>Chemical identification of <i>Tagetes minuta</i> Linnaeus (Asteraceae) essential oil and its acaricidal effect on ticks</b>
The control of tick species that affect animal production is vital for the economic welfare of the cattle industry. This study focused on testing the acaricidal activity of the essential oil from the leaves and stems of Tagetes minuta against several Brazilian tick species, including Rhipicephalus (Boophilus) microplus, Rhipicephalus sanguineus, Amblyomma cajennense and Argas miniatus. The chemical composition of the essential oil was determined by chromatography and spectroscopy analyses, which revealed the presence of monoterpenes. The adult immersion test (AIT) and the larval packet test (LPT) were used to evaluate the efficacy of T. minuta essential oil in tick management at concentrations of 2.5, 5, 10, 20 and 40%. The results demonstrated that the T. minuta essential oil had over 95% efficacy against four species of ticks at a concentration of 20%. These results suggest that the essential oil of T. minuta could be used as an environmentally friendly acaricide. O controle de carrapatos que causa impacto na produção de bovinos possui importância econômica para a cadeia produtiva. Neste trabalho objetivou-se testar a atividade acaricida do óleo essencial das folhas e caules de Tagetes minuta contra várias espécies de carrapatos brasileiros, incluindo Rhipicephalus (Boophilus) microplus, Rhipicephalus sanguineus, Amblyomma cajennense e Argas miniatus. A composição química do óleo foi determinada por GC-MS e análises de espectroscopia de RMN, que revelaram a presença de monoterpenos. Na avaliação destas substâncias no controle do carrapato foram empregados os testes de imersão de adulto (TIA) e o de pacote de larvas (TPL) para o extrato de óleo de T. minuta nas concentrações de 2,5%; 5%; 10%; 20% e 40%. Os resultados do TPL e TIA demonstraram que o óleo essencial na concentração de 20% de T. minuta apresenta eficácia superior a 95% nas quatro espécies de carrapato. Estes resultados sugerem que o óleo essencial de T. minuta pode ser usado como um acaricida eficaz e com baixo impacto ambiental.
- <b>Risk factors associated with <i>Toxoplasma gondii</i> seroprevalence in goats in the State of Paraíba, Brazil</b>
A cross-sectional study based on planned sampling was carried out to determine flock-level risk factors associated with Toxoplasma gondii antibody prevalence in dairy goat flocks in a semiarid region of northeastern Brazil. Serum samples from 975 adult dairy goats from 110 flocks were examined by indirect immonufluorescent antibody test (IFAT), using cut-off point at 1:64 dilution. From the 110 flocks, 77 presented at least one seropositive animal, corresponding to a prevalence of 70% (95% CI: 60.5-78.4%). Out of the 975 animals, 177 (18.1%; 95% CI = 15.8-20.7%) tested positive. The presence of toxic plants (OR = 5.11; P = 0.045) and the fact that goat breeding is not the main activity on the farm (OR = 3.34; P = 0.014) were identified as risk factors. The results of the present study showed evidence of the presence of T. gondii infection in dairy goats from a semiarid region of northeastern Brazil using planned sampling. Further studies are needed to elucidate the importance of the identified risk factors in the epidemiology of the infection. Foi conduzido um estudo transversal baseado em amostragem planejada com o objetivo de determinar fatores de risco associados com a prevalência de anticorpos contra Toxoplasma gondii, em rebanhos de caprinos leiteiros, em uma região semiárida do Nordeste do Brasil. Amostras de soro de 975 caprinos leiteiros adultos, procedentes de 110 propriedades, foram examinadas pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI), utilizando-se como ponto de corte a diluição 1:64. Das 110 propriedades, 77 apresentaram pelo menos um animal soropositivo, correspondendo a uma prevalência de 70% (IC 95%: 60,5-78,4%). Dos 975 animais, 177 (18,1%; IC 95% = 15,8-20,7%) foram positivos. Apesar da presença de plantas tóxicas (OR = 5,11; P = 0,045) e da caprinocultura não ser a principal atividade na propriedade (OR = 3,34; P = 0,014), foram identificados como fatores de risco. Os resultados do presente estudo mostraram uma evidência da presença da infecção por T. gondii, em caprinos leiteiros, em uma região semiárida do Nordeste do Brasil, utilizando-se uma amostragem planejada. Há necessidade de condução de estudos posteriores para elucidar a importância epidemiológica dos fatores de risco identificados.
- <b>Epidemiology of <i>Oestrus ovis</i> (Diptera: Oestridae) in sheep in Botucatu, State of São Paulo</b>
The seasonal factors that influence Oestrus ovis infestation in sheep were determined in Botucatu, State of São Paulo, Southwestern Brazil, from April 2008 to March 2011. Two tracer lambs were monthly exposed to natural infestation by O. ovis larvae for 28 consecutive days, by grazing with a sheep flock. Tracer animals were then euthanized and the larvae of O. ovis recovered from nasal and sinus cavities. Of the 72 tracer lambs, 50% were infested with O. ovis larvae and the mean intensity of infestation per head infested was 16.8 larvae, with an average of 7.8 L1, 5.3 L2 and 3.7 L3. O. ovis larvae were present during the four seasons of the year, but the mean larval burden was significantly higher during the spring and summer months, compared to winter (P < 0.05). The highest rate of larvae recovery coincided with mean temperatures between 20 °C and 25 °C and air relative humidity around 70%. Results suggest that evolution and development of O. ovis practically occurs throughout the entire year, with larval infestation especially frequent during the spring and summer months. Os fatores sazonais que influenciam a infestação por larvas de Oestrus ovis, foram determinados no período de abril de 2008 a março de 2011, em ovinos criados em Botucatu, São Paulo, região Sudeste do Brasil. Mensalmente, dois cordeiros traçadores permaneceram em pastejo com um rebanho ovino durante 28 dias consecutivos, expostos à infestação natural por larvas de O. ovis. Em seguida, os cordeiros foram sacrificados, e as larvas de O. ovis recuperadas da cavidade nasal e seios frontais. Dos 72 cordeiros traçadores, 50% estavam infestados por larvas de O. ovis, com intensidade média de infestação de 16,8 larvas/cabeça infestada, com média de 7,8 L1, 5,3 L2 e 3,7 L3. As larvas de O. ovis foram recuperadas durante as quatro estações do ano, mas o número médio de larvas foi significativamente superior durante os meses de primavera e verão comparado aos meses de inverno (P < 0,05). A maior taxa de recuperação larval coincidiu com temperaturas médias entre 20 °C e 25 °C e umidade relativa do ar por volta de 70%. Os resultados sugerem que a evolução e desenvolvimento de O. ovis ocorre praticamente durante o ano inteiro, mas a infestação é mais frequente nos meses de primavera e verão.
- <b>Parasites of economically important bivalves from the southern coast of Bahia State, Brazil</b>
This study investigated the parasites of three commercially important bivalve species (Crassostrea rhizophorae, Mytella guyanensis and Lucina pectinata) from the southern coast of Bahia, Brazil. A total of 540 specimens were collected in August 2009 and February 2010, at three localities. The bivalve specimens were measured on their longest axis, opened, and macroscopically examined for the presence of parasites or signs of disease. They were then fixed in Davidson' solution and subjected to routine histological processing, with paraffin embedding and H&E staining; next, the specimens were examined under a light microscope. No parasites were observed associated with L. pectinata. Rickettsia-like organisms (RLOs), Sphenophrya sp. (Ciliophora), Nematopsis sp. (Apicomplexa), Urastoma sp. (Turbellaria) and Bucephalus sp. (Digenea) were observed in both C. rhizophorae and M. guyanensis, as well as Ancistrocoma sp. (Ciliophora) and Tylocephalum sp. (Cestoda) in the former. A high prevalence of Nematopsis sp. was seen, but caused no apparent damage to the host. Bucephalus sp. caused the destruction of tissues, with castration, but showed low prevalence. The other parasites occurred in low prevalence and intensity, without causing significant damage. Neste estudo foram investigados os parasitos de três espécies de bivalves de interesse econômico (Crassostrea rhizophorae, Mytella guyanensis e Lucina pectinata) da Bahia. Foram analisados 540 exemplares, obtidos em duas coletas (agosto-2009 e fevereiro-2010), em três localidades. Os bivalves foram medidos quanto ao seu maior eixo, abertos e examinados macroscopicamente quanto à presença de parasitos ou sinais de enfermidades. Depois disso, foram fixados em solução de Davidson e processados por rotina de histologia, com inclusão em parafina e coloração com H&E. O material foi examinado ao microscópio de luz. Nenhum parasito esteve associado a L. pectinata. Bactérias do tipo RLOs (organismos assemelhados a Rickettsia), Sphenophrya sp. (Ciliophora), Nematopsis sp. (Apicomplexa), Urastoma sp. (Turbellaria) e Bucephalus sp. (Digenea) foram observados tanto em C. rhizophorae quanto em M. guyanensis, sendo que a primeira apresentou ainda Ancistrocoma sp. (Ciliophora) e Tylocephalum sp. (Cestoda). Nematopsis sp. ocorreu em alta prevalência, porém, aparentemente, não causou danos aos bivalves. Bucephalus sp. causou destruição de tecidos, com castração, mas foi pouco prevalente. Os demais parasitos ocorreram em baixa prevalência e intensidade de infecção e sem causar danos.
- <b>Occurrence of <i>Ehrlichia canis</i> and <i>Anaplasma platys</i> in household dogs from northern Parana</b>
Canine monocytic ehrlichiosis caused primarily by Ehrlichia canis and canine thrombocytic anaplasmosis induced by Anaplasma platys are important emerging zoonotic tick-borne diseases of dogs. There is evidence that these pathogens can also affect humans. This study evaluated the presence of E. canis and A. platys in blood samples collected from 256 domiciled dogs in the municipality of Jataizinho, located in north region of the State of Parana, Brazil, by PCR assay. The occurrence of E. canis and A. platys was 16.4% (42/256) and 19.4% (49/256), respectively; while 5.47% (14/256) of the dogs evaluated were co-infected by these two organisms. The presence of E. canis and A. platys was not significantly associated with the variables evaluated (sex, age, outdoor access, and presence of ticks during blood collection). Infection of dogs by E. canis was associated with anemia and thrombocytopenia, while infection induced by A. platys was related only to thrombocytopenia. Canine monocytic ehrlichiosis and canine thrombocytic anaplasmosis should be included in the differential diagnoses when these hematological alterations are observed during routine laboratory evaluation of dogs. Erliquiose monocítica canina, causada principalmente por Ehrlichia canis, e anaplasmose trombocítica canina, devida a infecção com Anaplasma platys, são importantes doenças transmitidas por carrapatos que acometem os cães, com evidências que podem também acometer o homem. O presente estudo avaliou a ocorrência desses agentes em amostras de sangue de 256 cães domiciliados na cidade de Jataizinho, na região Norte do Paraná, Brasil, utilizando a técnica da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). A ocorrência de E. canis e A. platys foi de 16,4% (42/256) e 19,4% (49/256), respectivamente, com 5,47% (14/256) dos animais apresentando coinfecção. Não foi observada associação significativa com as variáveis sexo, idade, acesso à rua e presença de carrapatos no momento da coleta de sangue. A infecção por E. canis teve relação com anemia e com trombocitopenia, enquanto a infecção por A. platys apresentou relação apenas com trombocitopenia. Com base nos resultados obtidos, reforçou-se a necessidade de que erliquiose e anaplasmose canina devem estar entre os diagnósticos diferenciais, quando da detecção de anemia e trombocitopenia em exames laboratoriais.
- <b>Recovery of <i>Trichostrongylus colubriformis</i> infective larvae from three grass species contaminated in the autumn</b>
This experiment aimed to assess the recovery of infective larvae (L3) of Trichostrongylus colubriformis from Brachiaria decumbens cv. Australiana, Cynodon dactylon cv. Coast-cross and Panicum maximum cv. Aruana. The experimental module comprised six plots, with two plots per herbage species. Larval survival was assessed from autumn to winter, under the effect of two herbage-paring heights (5 and 30 cm). TThe paring was carried out immediately before contamination with faces containing T. colubriformis eggs. The feces and herbage were collected at one, two, four, eight, 12 and 16 weeks after feces had been deposited in the experimental plots. In general, larvae were recovered from both herbage and feces until the 16th week. The longer persistence of these larvae in the environment was probably due to warmer temperatures. The number of L3 recovered from the pasture was not influenced by the height of plants, except for Brachiaria and Aruana herbage in the fourth week. Regarding the concentrations of larvae per kg of dry matter (L3/kg DM), recovery was higher from low pasture in all three herbage species. During the autumn, the development and survival of the T. colubriformis free-living stages were not affected by the different herbage species. O experimento teve como objetivo avaliar a recuperação de larvas infectantes (L3) de Trichostrongylus colubriformis em Brachiaria decumbens cv. Australiana, Cynodon dactylon cv. Coast-cross e Panicum maximum cv. Aruana. Foram utilizados módulos experimentais constituídos por seis canteiros, perfazendo dois canteiros por espécie forrageira. A sobrevivência larval foi avaliada do outono até o inverno, sob o efeito de duas alturas de poda (5 e 30 cm). A poda foi realizada imediatamente antes da deposição das fezes contaminadas com ovos de T. colubriformis. A colheita das fezes e da forragem foi realizada uma, duas, quatro, oito, 12 e 16 semanas após a deposição das fezes nos canteiros experimentais. De modo geral, foram recuperadas larvas das forragens e das fezes até a 16ª semana. Essas larvas persistiram por mais tempo no ambiente, provavelmente em razão das temperaturas mais amenas. O número de L3 recuperadas nas pastagens não foi influenciado pela altura das plantas, exceto nos capins braquiária e aruana na quarta semana. Já em relação às concentrações de larvas (L3/kg MS) recuperadas das três forrageiras, houve maior concentração nas pastagens baixas. Durante o outono, o desenvolvimento e a sobrevivência de estádios de vida livre de T. colubriformis não foram afetados pelos diferentes tipos de espécies de forrageiras.
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<i>Trichodina colisae</i> (Ciliophora: Trichodinidae)</b>: <b>new parasite records for two freshwater fish species farmed in Brazil</b>
Family Trichodinidae comprises ciliate protozoa distributed worldwide; they are considered some of the main parasitological agents infecting cultivated fish. However, the trichodinidae parasitizing important fish species cultured in Brazil are unknown, and more taxonomic studies on this group of parasites are required. This research morphologically characterizes Trichodina colisae Asmat & Sultana, (2005) of pacu (Piaractus mesopotamicus) and patinga hybrid (P. mesopotamicus × P. brachypomus) cultivated in the central and southeast regions of the country. Fresh assemblies were made from mucus scraped from the skin, fins and gills, fixed with methanol and, subsequently, impregnated with silver nitrate and stained with Giemsa for assessment under light microscopy. This research reports not only the second occurrence of T. colisae in the world, but also its first occurrence in South America. Tricodinídeos são protozoários ciliados móveis com ampla distribuição mundial; são considerados um dos agentes parasitários que mais acometem peixes cultivados. No Brasil, a maioria dos tricodinídeos que parasitam importantes espécies de peixes cultivados são desconhecidos, o que requer mais estudos taxonômicos com esse grupo de parasitos. Este estudo caracteriza morfologicamente Trichodina colisae Asmat & Sultana, 2005 de pacu (Piaractus mesopotamicus) e do híbrido patinga (P. mesopotamicus × P. brachypomus) cultivados, respectivamente, no Centro-Oeste e Sudeste do Brasil. Foram feitas montagens a fresco do raspado de muco da pele, nadadeiras e brânquias, fixados com metanol e, posteriormente, impregnados com nitrato de prata e coradas com Giemsa para avaliação em microscopia óptica. O presente estudo relata não só a segunda ocorrência de T. colisae no mundo, mas também a primeira ocorrência na América do Sul.
- <b>Canine visceral leishmaniasis</b>: <b>seroprevalence and risk factors in Cuiabá, Mato Grosso, Brazil</b>
In Brazil, canine visceral leishmaniasis (CVL) is endemic and the number of cases in humans and dogs has increased in the Midwest region. A transversal study was carried out in endemic areas from Cuiabá, State of Mato Grosso, to assess data on seroprevalence and risk factors associated to canine infection. Four hundred and thirty (430) dogs were randomly evaluated through indirect fluorescence antibody test (IFAT) considering variables related to the animals, the environment and the knowledge by owners on CVL aspects and control. From 430 dogs, 95 (22.1%) were seroreagent for leishmaniasis and animals living in rural environments present risk 1.9 times higher for acquiring the disease than those in urban environments (p = 0.01; OR 1.9). Factors related to animals' habits, such as free access to the street and guard function were considered indicators to predict infection by Leishmania sp. (p < 0.05) by statistical univariate analysis. The presence of agricultural activities was also a fact that contributed for the insurgence of the infection (p = 0.02; OR 1.68). The results contributed to the knowledge on the aspects of CVL in Cuiabá and point to an urgent need to include educational and sanitary programs in the city, since the region presents favorable characteristics for spreading the infection of CVL as already observed in other Brazilian cities. No Brasil, a leishmaniose visceral canina (CLV) é endêmica e, na região Centro-Oeste, o número de casos em humanos e cães tem aumentado. Um estudo transversal foi realizado em áreas endêmicas de Cuiabá (MT) com objetivo de avaliar dados sobre a soroprevalência e determinar os fatores de risco associados à infecção canina. Quatrocentos e trinta (430) cães foram aleatoriamente avaliados pelo teste de imunofluorescência indireta, considerando-se variáveis relacionadas aos animais, o ambiente e o conhecimento por parte dos proprietários sobre aspectos da CLV e seu controle. Dos 430 cães, 95 (22,1%) apresentaram-se soros reagentes para leishmaniose, e os animais que viviam em ambiente rural apresentaram risco 1,9 vezes maior de adquirir a infecção dos que aqueles em ambiente urbano (p = 0,01; OR 1,9). Fatores relacionados aos hábitos dos animais, tais como o livre acesso à rua e função de guarda, foram considerados indicadores para prever a infecção por Leishmania sp. (p. < 0,05) em análise estatística univariada. A presença de atividade agrícola foi também um fato que contribuiu para a ocorrência da infecção (p = 0,02; OR 1,68). Os resultados contribuem para o conhecimento sobre os aspectos da CVL em Cuiabá e apontam para uma necessidade urgente de incluir ações educativas e sanitárias na cidade, já que a região possui características favoráveis para a dispersão da doença como já observado em outras cidades.
- <b>Ctenocephalides felis felis vs. Ctenocephalides canis (Siphonaptera: Pulicidae)</b>: <b>some issues in correctly identify these species</b>
Ctenocephalides felis felis is one of the most important ectoparasites of dogs and cats throughout the world, because of its geographical distribution, dual parasitological action as an infesting agent and a vector of diseases, the economic losses and the acquired resistance against common insecticides. In Brazil, it surpasses Ctenocephalides canis in distribution, number of host species infested, prevalence and epidemiological importance. However, in some studies the species have been misidentified on the basis of their morphological characters included in taxonomic keys. The morphological variations of chaetotaxy, especially those on the dorsal margin of the hind tibia and lateral metanotal area (LMA), found in certain specimens, have sometimes been erroneously treated as hybrids, in spite of the nonexistence of the two species of Ctenocephalides in the same municipality or region. This review focuses on the characteristics used for interspecific diagnosis and intraspecific variations found between the species. Data on distribution, hosts, prevalence and parasitological action are also presented as an auxiliary means for recognizing the species. Ctenocephalides felis felis é um dos mais importantes ectoparasitos de cães e gatos no mundo inteiro, em virtude de sua distribuição geográfica, dupla ação parasitológica como agente infestante e vetor de doenças, perdas econômicas e resistência adquirida contra inseticidas comuns. No Brasil, ela sobrepuja Ctenocephalides canis em distribuição, número de espécies de hospedeiros infestadas, prevalência e importância epidemiológica. Todavia, em alguns estudos, as espécies têm sido incorretamente identificadas pelos caracteres morfológicos incluídos em chaves taxonômicas. As variações morfológicas de quetotaxia, especialmente aquelas da margem dorsal da tibia posterior e área metanotal lateral (LMA) encontradas em certos exemplares, algumas vezes têm sido erroneamente consideradas como híbridas, a despeito da inexistência das duas espécies em um mesmo município ou região. Esta revisão aborda as características utilizadas para o diagnóstico interespecífico e variações intra-específicas encontradas entre as espécies. Dados sobre distribuição, hospedeiros, prevalência e atuação parasitológica são também apresentados como um meio auxiliar para o reconhecimento das espécies.
- <b>
<i>Cryptosporidium</i> spp. infection in mares and foals of the northwest region of São Paulo State, Brazil</b>
The present study aimed to analyze the occurrence of infection by Cryptosporidium spp. in mares and their respective foals. This study was carried out in 11 farms located in the municipalities of Araçatuba, Birigui, Guararapes and Santo Antônio do Aracangua, in the northwest region of the State of Sao Paulo, from November 2010 to March 2011. A total of 98 mares and 98 foals of several breeds were analyzed; among foals, 59 were males and 39 females, aged from three to 330 days. Feces were collected directly from the rectal ampulla, purified and processed according to modified Kinyoun stain. Occurrence of Cryptosporidium spp. was 21.4% (21/98) for foals and 18.4% (18/98) for mares. Occurrence of Cryptosporidium spp. had significant association with breeds and age of animals. Results obtained led to the conclusion that foals older than two months and Mangalarga animals are less susceptible to the occurrence of Cryptosporidium spp. O presente estudo teve como objetivo analisar a ocorrência da infecção por Cryptosporidium spp. em éguas e seus respectivos potros. Este estudo foi realizado em 11 fazendas localizadas nos municípios de Araçatuba, Birigui, Guararapes e Santo Antônio do Aracangua, na região Noroeste do Estado de São Paulo, de novembro de 2010 a março de 2011. Um total de 98 éguas e 98 potros de diversas raças foram analisados, sendo que, entre os filhotes, 59 eram machos e 39 fêmeas, cujas idades variavam de três até 330 dias. Fezes foram colhidas diretamente da ampola retal, purificadas e processadas pela técnica de Kinyoun modificada. A ocorrência de Cryptosporidium spp. observada foi de 21,4% (21/98) para potros e 18,4% (18/98) para éguas. A ocorrência de Cryptosporidium spp. teve uma associação significativa com a raça e a idade dos animais. A partir dos resultados obtidos, conclui-se neste estudo que potros com idade superior a dois meses e animais da raça Mangalarga foram menos susceptíveis à ocorrência de Cryptosporidium spp.
- <b>Editorial</b>
- <b>Editorial</b>
- <b>Serologic evidence of equine granulocytic anaplasmosis in horses from central West Brazil</b>
Ehrlichiosis is a zoonotic disease caused by gram-negative and intracellular obligatory bacterial organisms. Equine Granulocytic Anaplasmosis - EGA (formerly Equine Granulocytic Ehrlichiosis, EGE) is a seasonal disease, normally self-limited in horses. There are few reports in Brazil about this ehrlichial agent, as well as its natural vectors. Nowadays, veterinarians are considering the suspicion of EGA in horses with suggestive symptoms of ehrlichiosis and which do not respond to piroplasmosis treatment. The aim of the present study was to identify horses exposed to the agent A. phagocytophilum by serological and molecular techniques. Twenty equine blood and serum samples from the central West region of Brazil were evaluated by microscopic examination of buffy coat smear, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), indirect fluorescent antibody test (IFAT) and nested polymerase chain reaction (nPCR). Additionally, the serodiagnosis of Theileria equi by IFA and ELISA were carried out, as well as molecular diagnosis by nPCR. Thirteen (65%) serum samples were positive for A. phagocytophilum by ELISA, but none of them were positive by buffy-coat smear examination or nPCR. Antibodies IgG anti-T. equi were detected in 18 (90%) and 17 (85%) horses by IFA and ELISA, respectively and the agent was detected in 9 (45%) animals by nPCR. Our data may be considered as important information to understanding the occurrence of EGA and equine piroplasmosis in central West Brazil. A Erliquiose é uma doença zoonótica causada por bactérias gram-negativas e intracelulares obrigatórias. A Anaplasmose Granulocítica Equina - AGE (anteriormente denominada Erliquiose Granulocítica Equina, EGE) é uma enfermidade sazonal, normalmente auto-limitante em equinos. No Brasil, existem poucos relatos deste agente erliquial, bem como de seus vetores naturais. Atualmente, veterinários têm levantado a suspeita de casos de AGE em equinos com sinais clínicos sugestivos de erliquiose e não responsivos ao tratamento para a piroplasmose equina. O objetivo do presente estudo foi identificar equinos expostos a A. phagocytophilum por meio de técnicas sorológicas e moleculares. Vinte amostras de sangue e soro de equinos da região Centro-oeste do Brasil foram avaliados por meio do exame microscópico de capa leucocitária, ensaio imunoenzimático indireto (ELISA), reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e reação em cadeia da polimerase (nested PCR). Adicionalmente, o diagnóstico sorológico de Theileria equi pela RIFI e ELISA foram realizados, assim como o diagnóstico molecular pelo nPCR. Treze (65%) amostras de soro foram positivas para A. phagocytophilum pelo teste de ELISA, entretanto nenhum equino foi positivo pelo exame microscópico da capa leucocitária ou nPCR. Anticorpos IgG anti-T. equi foram detectados em 18 (90%) e 17 (85%) equinos pela RIFI e ELISA, respectivamente e o agente foi detectado em 9 (45%) animais pelo nPCR. Estes dados sugerem importante informação para o entendimento da ocorrência da AGE e piroplasmose equina no Centro-oeste do Brasil.
- <b>Occurrence of ticks (Acari: Ixodidae) on human hosts, in three municipalities in the State of Pará, Brazil</b>
Assuming the existence of tick parasitism in humans in the State of Pará, an aggregate observational study was developed along a transversal line in three cities of the State, during two years. Interviews and examinations of 2,160 townspeople and tourists were carried out, without discrimination of ethnic, sex, age, or social status, and classified for effects analyzed for four bands of age, six types of activities in the society, and two sexes. Larvae, nymphs, and adults of ticks had been identified with cases of parasitism involving six species, of the genus Amblyomma, the genus Ixodes, Rhipicephalus sanguineus, Anocentor nitens, and Ornithodorus talaje (the first case registered in Pará), infecting human beings. Adults and agricultural workers were most frequently attacked, followed by students. A. cajennense and R. sanguineus are the species most frequent in the parasitism affecting humans, and A. cajennense is the dominant species. The statistical prevalence was largest in Cachoeira do Arari, Ilha do Marajó. In Santarém the greatest average intensity of parasitism was for R. sanguineus, and in the other locations it wasfor A. cajennense. Agricultural workers faced the greatest risk from parasitism, and to place in practice elementary measures of prevention would reduce by 25% the number of cases. Com a hipótese de parasitismo por carrapatos em humanos no Estado do Pará, foi desenvolvido estudo observacional, agregado, transversal em três mesoregiões do Estado, durante dois anos. Foram entrevistados e examinados 2.160 munícipes, e turistas, sem discriminação étnica, de sexo, idade, e social, classificados para efeito de análises em quatro faixas de idade, seis tipos de atividades na sociedade, e dois sexos. Houve casos de parasitismo por larvas, ninfas, e adultos de carrapatos, envolvendo seis espécies do gênero Amblyomma, o gênero Ixodes, Rhipicephalus sanguineus, Anocentor nitens e Ornithodorus talaje (primeiro registo para o Estado). Adultos e os trabalhadores rurais são os mais atacados, seguidos dos estudantes. A. cajennense e R. sanguineus são as espécies mais freqüentes no parasitismo de humano, e A. cajennense é a espécie dominante. A prevalência foi superior a 40% nos três municípios, e estatisticamente maior em Cachoeira do Arari, Ilha de Marajó. Em Santarém R. sanguineus teve a maior intensidade média de parasitismo, nos outros municípios foi por A. cajennense. Estar em atividade rural dobra o risco do parasitismo, e o esclarecimento da população, para colocar em prática medidas elementares de prevenção reduziria em 25% o número de casos.
- <b>Prevalence of <i>Neospora caninum</i> antibodies in sheep flocks of Uberlândia county, MG</b>
Neosporosis is a parasitic disease that occurs in sheep and is associated with reproductive failure. The aim of this study was to verify seroprevalence of Neospora caninum antibodies in 12 sheep flocks in Uberlândia county, Minas Gerais, Brazil, using Indirect Immunofluorescence Assay (IFA). A total of 334 sheep blood samples were analyzed and an epidemiologic questionnaire was applied for each farm in order to correlate with risk factors of neosporosis: gender, age, breed, abortion problems, contact with cattle and dogs, and presence of wild canids. The prevalence of Neospora caninum antibodies in sheep was 8.1%, with titers ranging from 50 to 3200 and 83.3% of farms detected at least one ovine reactive. There was statistically significant difference in flocks with abortion problems associated with the presence of Neospora caninum antibodies (p < 0.05). A neosporose é uma doença parasitária que acomete os ovinos e está associada a perdas reprodutivas. O objetivo deste estudo foi verificar a prevalência de anticorpos anti-Neospora caninum em 12 rebanhos de ovinos do município de Uberlândia, MG, utilizando a Técnica de Imunofluorescência Indireta (RIFI). Foram analisadas 334 amostras de sangue e, em cada propriedade, aplicou-se um questionário epidemiológico para avaliar os fatores de risco envolvidos na transmissão desse protozoário: sexo, idade, raça, problemas de aborto, contato com bovinos e caninos e presença de canídeos silvestres. A prevalência de anticorpos anti-Neospora caninum em ovinos foi de 8,1%, com títulos variando de 50 a 3200 e 83,3% das propriedades apresentaram pelo menos um ovino reagente. Houve diferença estatística significativa para rebanhos com problemas de aborto associados à presença de anticorpos anti-Neospora caninum (p < 0,05).
- <b>Prevalence and risk factors for <i>Toxoplasma gondii</i> infection in certified and non-certified pig breeding farms in the Toledo microregion, PR, Brazil</b>
Toxoplasma gondii infection has been diagnosed in pigs all over the world. Economical losses are generally related to reproductive disorders. Toxoplasma infection is also a matter of public health because tissue cysts of the parasite may remain in pork and pork products, and become sources of human infection. The objective of this study was to evaluate the frequency and risk factors associated with Toxoplasma infection in certified and non-certified pig breeding farms in the Toledo microregion, in the State of Paraná, Brazil which includes the cities of Toledo, Nova Santa Rosa, Sao José das Palmeiras and Sao Pedro do Iguaçu. Relative frequency of infection was 13.4%, independently of the type of farm. Logistic regression analysis showed that the following factors were associated with infection: absence of workers exclusive for each area of the farm, access of other animals to feeders and drinkers, lack of lids in drinkers, lack of rodent control measures, mean piglet number and weight at weaning per female. A infecção pelo Toxoplasma gondii tem sido diagnosticada em suínos em todo o mundo. Perdas econômicas geralmente estão relacionadas a distúrbios reprodutivos. A infecção pelo Toxoplasma tem também importância em saúde pública, já que cistos teciduais do parasito podem persistir na carne e subprodutos oriundos de suínos, que servirão de fontes de infecção para o ser humano. O objetivo deste trabalho foi verificar a frequência e os fatores de risco associados à infecção pelo Toxoplasma em granjas de reprodutores suídeos certificados ou não da microrregião de Toledo, no Paraná, que inclui os municípios de Toledo, Nova Santa Rosa, São José das Palmeiras e São Pedro do Iguaçú. A frequência relativa de infecção foi 13,4%, sem diferença com o tipo de granja. A análise de regressão logística demonstrou os seguintes fatores associados à infecção: não utilização de funcionários separados por área da granja, o acesso de animais ao cocho de ração e ao reservatório de água, a não utilização de tampa neste reservatório, a não prevenção de roedores, o número e peso médio de leitões ao desmame por porca.
- <b>Metazoan parasites of Mandi-amarelo <i>Pimelodus maculatus </i>and of Jundiá <i>Rhamdia quelen</i> (Osteichthyes: Siluriformes) of Paraíba do Sul River, Volta Redonda, Rio de Janeiro</b>
Forty-one specimens of mandi-amarelo Pimelodus maculatus Lacépède, 1803 (Siluriformes: Pimelodidae) and 54 specimens of jundiá Rhamdia quelen (Quoy & Gaimard, 1824) (Siluriformes: Heptapteridae) were collected from the Paraíba do Sul River, Volta Redonda, State of Rio de Janeiro, Brazil between November 2007 and October 2008. These fish underwent necropsy so their infracommunities of metazoan parasites could be studied. The same three species of parasites were collected in the two fish species studied. These were one monogenean, one nematode, and one hirudinean. Cucullanus pinnai (Travassos, Artiga, and Pereira, 1928) (Nematoda: Cucullanidae) and Aphanoblastella sp. (Monogenea: Dactylogyridae) were the dominant species with the highest prevalence in P. maculatus and R. quelen. The parasite species of P. maculatus and R. quelen showed an atypical over-dispersed pattern of distribution. No parasite species showed significant correlation between the body total length of the siluriform hosts and their prevalence and abundance. The parasite species richness showed a mean value of 0.87 ± 0.67 (0 -2) and 0.57 ± 0.56 (0 -2) in P. maculatus and R. quelen, respectively, and no correlation with the body total length. Quarenta e um espécimes do mandi-amarelo Pimelodus maculatus Lacépède, 1803 (Siluriformes: Pimelodidae) e 54 espécimes do jundiá Rhamdia quelen (Quoy & Gaimard, 1824)(Siluriformes: Heptapteridae) foram coletados no Rio Paraíba do Sul, Volta Redonda, Estado do Rio de Janeiro, entre novembro de 2007 e outubro de 2008. Os peixes foram necropsiados para o estudo das suas infracomunidade de metazoários parasitos. Foram coletadas as mesmas três espécies de metazoários parasitos nas duas espécies de peixes estudadas. Estes foram um monogenético, um nematóide e um hirudíneo. Cucullanus pinnai (Travassos, Artiga e Pereira, 1928) (Nematoda: Cucullanidae) e Aphanoblastella sp. (Monogenea: Dactylogyridae) foram as espécies dominantes com os maiores valores de prevalência em P. maculatus e R. quelen, respectivamente. As espécies de parasitos de P. maculatus e R. quelen apresentaram típico padrão de distribuição superdispersa. Nenhum parasito apresentou correlação significativa entre o comprimento total dos siluriformes estudados e a prevalência e abundância parasitária. A riqueza parasitária apresentou média de 0,87 ± 0,67 (0 - 2) e 0,57 ± 0,56 (0 - 2) em P. maculatus e R. quelen, respectivamente, e sem correlação com o comprimento total dos hospedeiros.
- <b>The influence of the fasting period on the number of nymphal instars and on the sex ratio of <i>Argas</i> (<i>Persicargas</i>) <i>miniatus</i> (Acari: Argasidae)</b>
The current study investigated the biology of nymphs of the first and second instars of Argas (Persicargas) miniatus. Nymphs were deprived of food for 15, 30 or 60 days and held at 27 ± 1 ºC and 80 ± 10% relative humidity (controlled conditions) or at room conditions of temperature and relative humidity. Nymphs of first instar deprived of food for 15 or 30 days molted to second and third instars in both controlled and room conditions. Nymphs of the first instar deprived of food for 60 days had 28 and 37% mortality in controlled and room conditions, respectively; and survivors did not attach to the host. Nymphs of the second instar, deprived of food for 60 days, molted either to the third instar or to males after feeding on Gallus gallus, and the nymphs of the third instar developed to adults (42.42% males and 36.36% females when nymphs were held in controlled temperature and humidity conditions, and 40.54% males and 48.65% females when nymphs were held in room conditions). The remainder of the nymphs molted to the fourth instar and then molted to females. In conclusion, the nymphal starvation period of 60 days determined the number of nymph instars in the life cycle of A. miniatus under the experimental conditions studied. Os aspectos biológicos de ninfas de primeiro e segundo instares de Argas (Persicargas) miniatus quando submetidas a diferentes períodos de jejum (15, 30 e 60 dias), foram estudados em estufa climatizada (27 ± 1 ºC e 80 ± 10% de umidade relativa) e em ambiente de laboratório. Ninfas de primeiro instar que foram submetidas a um período de jejum de 15 e 30 dias mudaram para ninfas de segundo e terceiro instar, em ambas as condições estudadas. No período de 60 dias de jejum verificou-se mortalidade de 28 e 37% das ninfas de primeiro instar, em estufa climatizada e em ambiente de laboratório, respectivamente. As ninfas sobreviventes não se fixaram sobre os hospedeiros. As ninfas de segundo instar, após 60 dias de jejum, desenvolveram-se em ninfas de terceiro instar ou machos, quando alimentadas em Gallus gallus. Ainda neste grupo, as ninfas de terceiro instar mudaram para adultos (42,42 e 40,54% machos; 36,36 e 48,65% fêmeas, nas condições ambiente de laboratório e estufa climatizada, respectivamente) e o restante desenvolveu-se em ninfas de quarto instar que por sua vez mudaram para fêmeas. Então, a situação de jejum (60 dias) em que as ninfas foram submetidas determinou o número de ninfas no ciclo biológico de A. miniatus, sob as condições experimentais estudadas.
- <b>Detection of antibodies against <i>Babesia bovis</i> and <i>Babesia bigemina</i> in calves from the region of Araguaína, State of Tocantins, Brazil</b>
The aim of this study was to determine the seroprevalence of antibodies against B. bovis and B. bigemina in calves from the region of Araguaína, State of Tocantins, Brazil. In this research we used sera obtained from 506 calves, from both genders and of 8 to 24 months old, to detect antibodies by indirect Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA-test). Statistical analysis of the data was performed using the Chi-square (χ2) test with Yates correction. The seroprevalence obtained was 90.5 and 91.7% for B. bigemina and B. bovis, respectively, characterizing the region as an area of enzootic stability for the species analyzed. The seroprevalence to B. bovis showed higher positivity among calves 19-24 months old. O objetivo desse estudo foi determinar a soroprevalência de anticorpos anti-B. bovis e anti-B. bigemina em bezerros da região de Araguaína, Estado do Tocantins, Brasil. Nesta pesquisa foram coletadas 506 amostras de soros de bezerros com faixa etária entre 8 e 24 meses, fêmeas e machos, as quais foram processadas pelo ensaio imunoenzimático indireto (ELISA-teste). Como análise estatística utilizou-se o Qui-Quadrado (χ2) com correção de Yates. As prevalências obtidas em bezerros foram de 90,5 e 91,7% para B. bigemina e B. bovis, respectivamente, caracterizando esta região como de estabilidade enzoótica para as espécies analisadas. A soroprevalência para B. bovis apresentou maior positividade entre os bezerros com faixa etária de 19-24 meses.
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<i>Amblyomma rotundatum</i>
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<b> (Koch, 1844) (Acari: Ixodidae) two-host life-cycle on Viperidae snakes</b>
Amblyomma rotundatum is an ixodid tick that infests ectothermic animals and reproduces exclusively by parthenogenesis. This tick has been frequently reported to infest reptiles and amphibians, under natural conditions and sometimes in captivity. It was described in Brazil and several other countries of South, Central and North America. Although many studies have reported aspects of its biology, none of them has used regularly either ophidian as hosts, or controlled temperature, humidity and luminosity for parasitic stages. The objective of this experiment was to study the life cycle of A. rotundatum feeding on Viperidae snakes under room controlled conditions at 27 ± 1 ºC temperature, 85 ± 10% relative humidity and 12:12 hours photoperiod for parasitic stages, and under B.O.D incubator conditions at 27 ± 1 ºC temperature, 85 ± 10% relative humidity and scotophase for non-parasitic stages. The total duration of the life cycle ranged from 56 to 163 days (mean of 105 days). Two-host life cycle was observed for most of the ixodid population studied. Amblyomma rotundatum é um carrapato da família Ixodidae, parasito de animais pecilotérmicos, e que se reproduz exclusivamente por partenogênese. Este carrapato é frequentemente relatado infestando répteis e anfíbios em condições naturais e, às vezes, em animais de cativeiro. Ele já foi relatado no Brasil e em vários outros países das Américas do Sul, Central e do Norte. Embora muitos estudos sobre sua biologia tenham sido publicados, nunca foram utilizados ofídios como hospedeiros e, tão pouco, foram realizados ensaios com os estádios parasitários sob condições controladas de temperatura, umidade e iluminação. O objetivo deste experimento foi estudar o ciclo biológico de A. rotundatum se alimentando em serpentes da família Viperidae sob condições ambientais controladas a 27 ± 1 ºC de temperatura, 85 ± 10% de umidade relativa do ar e 12:12 horas de fotoperíodo para estágios parasitários; assim como sob condições iguais a 27 ± 1 ºC de temperatura, 85 ± 10% de umidade relativa do ar e escotofase em estufas de germinação para estádios não parasitários. A duração total do ciclo de vida variou de 56 a 163 dias (média de 105 dias). Observou-se ciclo dioxênico para a a maior parte da população dos ixodídeos em estudo.
- <b>Detection of <i>Toxoplasma gondii </i>in the reproductive system of male goats</b>
Male goats of mating age serologically negative for Toxoplasma gondii were divided into three groups: GI - controls (placebo) (n = 2); GII - infected with 1 × 10(6) tachyzoites (RH strains) (n = 2); and GIII - infected with 2 × 10(5) oocysts (P strains) (n = 2). Clinical, hematology, parasite and serology tests and studies of parasites in the semen through bioassay and polymerase chain reaction (PCR), and in reproductive organs (bioassay) were performed to assess toxoplasma infection. Serological titers peaked at 4096 in two animal groups infected with the protozoan. The bioassays allowed an early detection of protozoa in semen samples of tachyzoite-inoculated animals. T. gondii DNA was identified through PCR in the semen in five (Days 5, 7, 28, 49, and 70) and two (both at day 56) different days post-inoculation in GII and GIII animals, respectively. It was also possible to detect T. gondii DNA in reproductive organs (prostate pool, testicles, seminal vesicle and epididymis) of goats inoculated with either tachyzoites or oocysts. The present study suggests the possibility of venereal transmission of T. gondii among goats and it should be further assessed. Caprinos machos, em idade reprodutiva, sorologicamente negativos para Toxoplasma gondii foram distribuídos em três grupos de animais: GI (n = 2) controle (placebo), GII (n = 2) - infectado com 1 × 10(6) taquizoítos (cepa RH) e GIII (n = 2) infectado com 2 × 10(5) oocistos (cepa P). Exames clínicos, hematológicos, parasitêmicos, sorológicos, pesquisa no sêmen e em tecidos do sistema reprodutor, por meio da bioprova, e da Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR), foram conduzidas para avaliar a infecção toxoplásmica. Os títulos sorológicos alcançaram valores máximos de 4096 nos dois grupos de animais infectados. Pela técnica da bioprova, foi possível revelar precocemente a presença do coccídio nas amostras seminais dos animais inoculados com taquizoítos. Pela PCR, foi possível identificar, no sêmen, material genético de T. gondii, em cinco (5º, 7º, 28º, 49º e 70º) e em duas (ambos ao 56º) datas experimentais pós-inoculação dos animais pertencentes aos grupos GII e GIII, respectivamente.Por esta mesma técnica, foi possível ainda isolar material genético deste protozoário, também em amostras teciduais (pool de próstata, testículo, vesícula seminal e epidídimo) dos caprinos inoculados com taquizoítos e oocistos. A presente pesquisa sugere a possibilidade da ocorrência da transmissão sexual do T. gondii na espécie caprina.
- <b>Evaluation of reduction in egg shedding of gastrointestinal nematodes in cattle following administration of anthelmintics</b>
To evaluate the necessary time and to identify the differences among anthelmintics for the reduction of parasite eggs shed in feces, five groups of cattle were treated with moxidectin, ivermectin, levamisole phosphate, and albendazole sulphoxide. Levamisole promoted a reduction in egg count per gram (EPG-R) of 97.4% after 24 hours, moxidectin 98.3% after 36 hours, and albendazole sulphoxide 95.9% after 36 hours post- treatment. Cooperia spp. and Haemonchus spp. showed resistance to ivermectin. The results demonstrated that the diagnosis of parasite resistance in cattle can be based on a count of eggs per gram (EPG) carried out as soon as seven days after the treatment. No intuito de avaliar o tempo necessário para redução dos valores de OPG visando identificar o início de atuação dos anti-helmínticos, cinco grupos de novilhos, naturalmente infectados por nematódeos gastrintestinais foram tratados com moxidectina, ivermectina, fosfato de levamisol e sulfóxido de albendazol. O levamisol promoveu redução no número de ovos de nematódeos eliminados nas fezes (R-OPG) de 97,4% 24 horas após a aplicação, a moxidectina de 98,3% após 36 horas, e o sulfóxido de albendazol de 95,9% após 36 horas. Foi registrada a presença de Cooperia spp. e Haemonchus spp. com resistência a ivermectina. A contagem de OPG realizada aos sete dias pós-tratamento apresentou resultados similares aos obtidos nas contagens realizadas 10 e 14 dias após a aplicação dos anti-helmínticos avaliados, demonstrando que o intervalo adequado entre o tratamento anti-helmíntico e o exame para verificar a redução do OPG pode ser de 7 dias.
- <b>Real time polymerase chain reaction to diagnose <i>Anaplasma marginale</i> in cattle and deer (<i>Ozotoceros bezoarticus leucogaster</i>) of the Brazilian Pantanal</b>
Epizootiological study of Anaplasma marginale in regions that contain various reservoir hosts, co-existence of rickettsia pathogens, and common vectors is a complicated task. To achieve diagnosis of this rickettsia in cattle and campeiro deer of Brazilian Pantanal, a comparison was made between a real time polymerase chain reaction (RT-PCR) with intercalating Sybr Green fluorochrome and primers based on msp5 gene of A. marginale; a conventional PCR (C-PCR); and parasitological examination using thin blood smear stained with Giemsa-MayGrunwald. Both PCRs showed good performance in the diagnosis of A. marginale in cattle, and were superior to the parasitological exam. The RT-PCR detected seven positive campeiro deer (16.3%). This rate was significantly higher compared to C-PCR, which identified one animal as positive (2.3%), and also compared to parasitological diagnosis, which did not find any positive animals. The dissociation temperature average of positive reactions in cattle (81.72 ºC ± 0.20) was identical to dissociation temperature found in the cervids (81.72 ºC ± 0.12), suggesting that both animal species were infected with A. marginale. We concluded that RT-PCR can be used for A. marginale diagnosis and in epizootiological studies of cattle and cervids; in spite of the small number of campeiro deer samples, the results indicated that this wildlife species has importance in the Anaplasma epizootiology in the Brazilian Pantanal. O estudo epizootiológico de Anaplasma marginale em regiões que existem vários reservatórios, co-existência de espécies de riquétsias patógenas e vetores comuns é uma tarefa complicada. Com o objetivo de obter o diagnóstico dessa riquétsia em bovinos e veado campeiro do Pantanal brasileiro foi avaliada uma reação da polimerase em cadeia em tempo real (PCR-TR) com o fluoróforo intercalante de fita dupla de DNA Sybr Green e iniciadores baseados na seqüência do gene msp5 de A. marginale comparando-a a uma PCR convencional (PCR-C) e ao exame parasitológico de esfregaço fino de sangue corado com Giemsa-MayGrunwald. Ambas PCRs apresentaram bom desempenho no diagnóstico de A. marginale nos bovinos, o qual foi superior ao exame parasitológico. O PCR-TR detectou sete veados campeiros positivos (16,3%), o que foi significativamente maior comparado ao PCR-C identificando um animal como positivo (2,3%), e ao exame parasitológico não encontrou nenhum animal positivo. A média da temperatura de dissociação das reações positivas para amostras de bovinos (81,72 ºC ± 0,20) foi idêntica àquelas dos cervídeos ( 81,72 ºC ± 0,12), o que sugere que ambas espécies animais foram infectadas por A. marginale. Concluímos que PCR-TR pode ser utilizada para diagnóstico e estudos epizootiológicos de A. marginale em bovinos e cervídeos. Apesar da pequena amostragem de veado campeiro os resultados indicam que essa espécie de animal selvagem tem importância na epizootiologia do Anaplasma no Pantanal brasileiro.
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<i>Amblyomma aureolatum</i>
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<b> (Acari: Ixodidae) parasitizing margay (<i>Leopardus wiedii</i>) in Rio Grande do Sul</b>
We report the finding of Amblyomma aureolatum (Acari: Ixodidae) parasitizing margay (Leopardus wiedii) in the locality of Gravataí (29º 47' 12.9'' S and 50º 53' 44.1'' W; 241 m alt.), State of Rio Grande do Sul, Southern Brazil. This is the first report of this species of Ixodidae on margay in Southern Brazil. This finding indicates an increased number of hosts for this tick species. Foi registrado o encontro de Amblyomma aureolatum (Acari: Ixodidae) em gato-maracajá (Leopardus wiedii), na localidade de Gravataí (29º 47' 12,9'' S and 50º 53' 44,1'' O; 241 m alt.), região metropolitana de Porto Alegre, Rio Grande do Sul. Esse é o primeiro registro desse ixodídeo parasitando essa espécie de felídeo e amplia a distribuição de hospedeiros no estado.
- <b>New tick records in Rondônia, Western Brazilian Amazon</b>
In the present study, we provide new tick records from Vilhena Municipality, in the Southeast of the State of Rondônia, Northern Brazil. Ticks collected from a capybara, Hydrochoerus hydrochaeris (Linnaeus), were identified as Amblyomma romitii Tonelli-Rondelli (1 female), and Amblyomma sp. (1 larva). Ticks collected from a harpy eagle, Harpia harpyja (Linnaeus), were identified as Amblyomma cajennense (Fabricius) (16 nymphs) and Haemaphysalis juxtakochi Cooley (1 nymph). Ticks collected from a yellow-footed tortoise, Chelonoidis denticulada (Linnaeus), were identified as Amblyomma rotundatum Koch (10 females, 2 nymphs), and Amblyomma sp. (2 larvae). The present record of A. romitii is the first in the State of Rondônia, and represents the southernmost record for this tick species, indicating that its distribution area is much larger than currently recognized. Although both A. cajennense and H. juxtakochi have been reported parasitizing various bird species, we provide the first tick records on a harpy eagle. A. rotundatum is widespread in the State of Rondônia, and has been previously reported on the yellow-footed tortoise. The present records increase the tick fauna of Rondônia to 26 species. O presente estudo relata novos achados de carrapatos provenientes do Município de Vilhena, Sudeste do Estado de Rondônia, na região Norte do Brasil. Carrapatos colhidos de uma capivara, Hydrochoerus hydrochaeris (Linnaeus), foram identificados como Amblyomma romitii Tonelli-Rondelli (1 fêmea) e Amblyomma sp. (1 larva). Carrapatos colhidos de uma águia harpia, Harpia harpyja (Linnaeus), foram identificados como Amblyomma cajennense (Fabricius) (16 ninfas) e Haemaphysalis juxtakochi Cooley (1 ninfa). Carrapatos colhidos de um jabuti, Chelonoidis denticulada (Linnaeus), foram identificados como Amblyomma rotundatum Koch (10 fêmeas, 2 ninfas) e Amblyomma sp. (2 larvas). O presente achado de A. romitii é o primeiro no Estado de Rondônia, representando o achado mais meridional desta espécie de carrapato, indicando que sua distribuição geográfica é mais ampla do que se supunha. Embora A. cajennense e H. juxtakochi têm sido relatados parasitando várias espécies de aves, o presente relato em harpia é o primeiro registro de carrapatos nesta espécie de hospedeiro. A. rotundatum ocorre amplamente no Estado de Rondônia e tem sido previamente relatado parasitando jabutis. Estes registros ampliam a fauna de carrapatos de Rondônia para 26 espécies.
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<i>Toxoplasma gondii</i>
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<b> antibodies on domiciled cats from Lages municipality, Santa Catarina State, Brazil</b>
Sera were collected from 300 domiciled cats from the municipality of Lages, Southern Brazil, to determine the prevalence of Toxoplasma gondii antibodies and risk factors associated. Tests for T. gondii antibodies were performed using indirect immunofluorescent antibody test (IFAT). Positive reactions with titers >1:64 were found in 43 (14.33%) cats. A significant number of seropositive cats were >6 month old (p = 0.03758) and had access to the streets or/and rural areas (p = 0.04185). The results indicate that T. gondii is widespread in cats in Lages with a prevalence of 14.33%. Amostras de sangue foram obtidas de 300 gatos domiciliados para determinar a prevalência de anticorpos contra Toxoplasma gondii e possíveis fatores de risco. A detecção de anticorpos da classe IgG foi realizada por meio da Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI). Reações positivas com títulos >1:64 foram encontradas em 43 (14,33%) gatos. Os títulos encontrados variaram de 1:64 a 1:4096, sendo que 19 animais (44,19%) tiveram titulação de 1:64, 18 animais (41,86%) com 1:256, cinco animais (11,63%) com 1:1024 e um animal (2,32%) teve titulação de 1:4096. Foi verificada correlação entre soropositividade dos felinos ao T. gondii e idade (p = 0,03758) e com o acesso à rua e/ou zona rural (p = 0,04185). Os resultados indicam que T. gondii está disseminado entre os gatos domiciliados de Lages, Estado de Santa Catarina, Brasil, com uma prevalência de 14,33%.
- <b>Evaluation of anthelmintic activity of liquid waste of <i>Agave sisalana</i> (sisal) in goats</b>
It was evaluated the anthelmintic activity of Agave sisalana (sisal) juice against gastrointestinal nematodes and its potential toxic effects in goats. In vitro tests showed more than 95% reduction in larval counts of the genus Haemonchus spp. at concentrations between 86.5 and 146.3 mg.mL-1. In vivo the percent reduction of larvae of the fourth (L4) and fifth (L5) stages of Haemonchus, Oesophagostomum and Trichostrongylus was less than 95% in groups GI and GII, and between 80 and 90% in group GIII. A. sisalana juice at the concentrations tested in vitro was effective against gastrointestinal nematodes in goats; however, its anthelmintic efficacy was reduced when administered to animals. Foi avaliada a atividade anti-helmíntica do suco de Agave sisalana (sisal) contra nematódeos gastrintestinais e possíveis efeitos tóxicos em caprinos. Nos testes in vitro, encontrou-se redução superior a 95% na contagem de larvas do gênero Haemonchus spp. nas concentrações entre 86,5 e 146,3 mg.mL-1. In vivo, o percentual de redução de larvas de quarto (L4) e quinto (L5) estágios de Haemonchus, Oesophagostomum e Trichostrongylus foi inferior a 95% para o GI e GII, e entre 80 e 90% para o GIII. O suco de A. sisalana nas concentrações testadas in vitro foi efetivo contra nematódeos gastrintestinais de caprinos, apresentando, no entanto, reduzida eficácia anti-helmíntica quando administrado nos animais.
- <b>Occurrence of <i>Theileria equi</i> in horses raised in the Jaboticabal microregion, São Paulo State, Brazil</b>
Blood and serum samples from 170 horses raised in the Jaboticabal microregion, São Paulo State, Brazil, were collected and tested by microscopic examination of blood smears, indirect fluorescent antibody test (IFAT) and nested polymerase chain reaction (nPCR) for Theileria equi infections. The association among the test results was verified by the McNemar test. During the examination of thin blood smears, parasites were detected in six (3.52%) horses. Anti-T. equi antibodies were detected in 100% sera samples, with titers ranging between 1:80 and 1:5120. The nPCR based on the T. equi merozoite antigen gene (EMA-1) allowed the visualization of specie-specific amplified product in 108 (63.53%) horses. All six samples judged positive microscopically were also positive for nPCR. Statistical analysis indicated general disagreement (p < 0.0001) between IFAT and nPCR; IFAT and blood smear; and nPCR and blood smear on the detection of parasite carriers. The results of the present study indicate that T. equi is widely spread among horses in the Jaboticabal microregion, Northeast region of São Paulo State, Brazil. Amostras de sangue e soro de 170 equinos criados na microrregião de Jaboticabal, Estado de São Paulo, Brasil, foram coletadas e avaliadas pelo exame direto em esfregaço sanguíneo, reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e nested reação em cadeia da polimerase (nPCR) para a detecção de infecções por Theileria equi. A concordância dos resultados entre os testes de diagnóstico foi verificada pelo teste de McNemar. Durante o exame dos esfregaços sanguíneos, parasitos foram detectados em seis (3,52%) equinos. Anticorpos anti-T. equi foram detectados em 100% das amostras de soros, com títulos variando entre 1:80 e 1:5120. O nPCR, baseado na sequência do gene do antígeno de merozoíto de T. equi (EMA-1), permitiu a visualização de produtos de amplificação espécie-específico em 108 (63,53%) equinos. Houve diferença altamente significativa (p < 0,0001) entre RIFI e nPCR; RIFI e esfregaço sanguíneo; e nPCR e esfregaço na detecção do parasito. O resultado do presente estudo indica que a infecção por T. equi está amplamente distribuída entre os equinos na microrregião de Jaboticabal, região Nordeste do Estado de São Paulo, Brasil.
- <b>Seroprevalence of <i>Rickettsia bellii </i>and<i> Rickettsia felis</i> in dogs, São José dos Pinhais, State of Paraná, Brazil</b>
Brazilian spotted fever (BSF) is a vector-borne zoonosis caused by Rickettsia rickettsii bacteria. Dogs can be host sentinels for this bacterium. The aim of the study was to determine the presence of antibodies against Rickettsia spp. in dogs from the city of São José dos Pinhais, State of Paraná, Southern Brazil, where a human case of BSF was first reported in the state. Between February 2006 and July 2007, serum samples from 364 dogs were collected and tested at 1:64 dilutions by indirect immunofluorescence assay (IFA) against R. rickettsii and R. parkeri. All sera that reacted at least to one of Rickettsia species were tested against the six main Rickettsia species identified in Brazil: R. rickettsii, R. parkeri, R. bellii, R. rhipicephali, R. amblyommii and R. felis. Sixteen samples (4.4%) reacted to at least one Rickettsia species. Among positive animals, two dogs (15.5%) showed suggestive titers for R. bellii exposure. One sample had a homologous reaction to R. felis, a confirmed human pathogen. Although Rickettsia spp. circulation in dogs in the area studied may be considered at low prevalence, suggesting low risk of human infection, the present data demonstrate for the first time the exposure of dogs to R. bellii and R. felis in Southern Brazil. A febre maculosa brasileira (FMB) é uma zoonose veiculada por carrapatos e causada pela bactéria Rickettsia rickettsii, podendo os cães ser hospedeiros sentinelas para essa bactéria. O objetivo do estudo foi determinar a presença de anticorpos contra Rickettsia spp. em cães de São José dos Pinhais, estado do Paraná, Sul do Brasil. Entre fevereiro de 2006 e julho de 2007, amostras séricas de 364 cães foram coletadas e testadas na diluição de 1:64 por Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) contra R. rickettsii e R. parkeri. Todos os soros reagentes para pelo menos uma espécie de Rickettsia foram testados contra as seis principais espécies de Rickettsia identificadas no Brasil: R. rickettsii, R. parkeri, R. bellii, R. rhipicephali, R. amblyommii e R. felis. Dezesseis amostras (4,4%) reagiram para pelo menos uma espécie de Rickettsia. Dos animais positivos, dois cães (15,5%) apresentaram títulos sugestivos de exposição a R. bellii. Uma amostra apresentou reação homóloga frente à R. felis, um agente patogênico confirmado para seres humanos. Muito embora os resultados demonstrem uma baixa prevalência de Rickettsia spp. em cães, sugerindo um baixo risco de infecção humana, este estudo relatou pela primeira vez a evidência de exposição a R. bellii e R. felis em cães no Sul do Brasil.
- <b>Efficacy evaluation of a commercial neem cake for control of <i>Haematobia irritans</i> on Nelore cattle</b>
Much attention has been given to the development of botanical insecticides to provide effective natural control of cattle ectoparasites without harming animals, consumers, and environment. This study evaluated the efficacy of a commercial neem cake in controlling Haematobia irritans infestation on cattle. The study was conducted at the Embrapa Southeast Cattle Research Center (CPPSE), in São Carlos, SP, Brazil, from April to July 2008. The neem cake mixed in mineral salt in a 2% concentration was provided to 20 Nelore cows during nine weeks and had its efficacy evaluated by comparison of the infestation level against a control group. Fly infestations were recorded weekly by digital photographs of each animal from both groups and the number of flies was later counted in a computer-assisted image analyzer. Quantification of neem cake components by high-performance liquid chromatography revealed the presence of azadirachtin (421 mg.kg-1) and 3-tigloyl-azadirachtol (151 mg.kg-1) in the tested neem cake. Addition of the 2% neem cake reduced mineral salt intake in about 22%. The 2% neem cake treatment failed to reduce horn fly infestations on cattle during the 9-week study period. Muita atenção tem sido dada ao desenvolvimento de inseticidas vegetais buscando-se um efetivo controle de ectoparasitas de bovinos, sem prejudicar animais, consumidores e meio ambiente. Este estudo, realizado de abril a julho de 2008, na Embrapa Pecuária Sudeste, em São Carlos, SP, Brasil, avaliou a eficácia de uma torta comercial de nim (Azadirachta indica) no controle da mosca-dos-chifres (Haematobia irritans) em bovinos. A torta de nim, misturada ao sal mineral na concentração de 2%, foi fornecida a 20 vacas Nelore, durante nove semanas, e sua eficácia foi monitorada através de contagens semanais nos grupos tratado e controle. Infestações individuais foram registradas por meio de fotos digitais em todos os animais de ambos os grupos, e o número de moscas foi, posteriormente, quantificado com o auxílio de um sistema de análise de imagem computadorizado. A quantificação dos componentes da torta de nim, por cromatografia líquida, revelou a presença de azadiractina (421 mg.kg-1) e 3-tigloyl-azadirachtol (151 mg.kg-1). A adição da torta de nim a 2% reduziu o consumo de sal mineral em cerca de 22%. O tratamento com torta de nim a 2% não reduziu as infestações por mosca-dos-chifres em bovinos durante as nove semanas do estudo.
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<i>Toxoplasma gondii</i>
</b>: <b>humoral and cellular immune response of BALB/c mice immunized via intranasal route with rTgROP2</b>
TgROP2 is an intracellular protein associated with rhoptries of Toxoplama gondii and an antigen component of a candidate vaccine for toxoplasmosis. The purpose of the present study was to evaluate the efficacy of rTgROP2 to stimulate humoral and cellular immune responses in BALB/c mice via intranasal injection. TgROP2 partial coding sequence was (196-561) amplified by PCR from genomic T. gondii RH strain DNA and cloned into the pTrcHis expression vector. Escherichia coli Rosetta 2 cells transformed with pTrcHis-TgROP2 showed high levels (~1 mg.mL-1) of recombinant protein after 4 hours of IPTG induction. Recombinant TgROP2 exhibited an apparent Mr equal to 54 kDa. In order to test immunogenicity of the recombinant protein, 10 BALB/c mice received 10 µg of rROP2 protein + 10 µg of Quil-A via intranasal injection. Doses were administered at days 0, 21, and 42. Three animals were euthanized and used to evaluate cell-ular immune response on day 62. Five (50%) and two (20%) out of ten animals produced IgG (DO mean = 0.307; cut-off = 0.240) and IgA (DO mean = 0.133, cut-off = 0.101), respectively, by ELISA on day 62. The proliferation of splenocytes revealed high stimulation index (SI) when co-cultured with 5, 10 and 15 µg.mL-1 of rTgROP2. These results indicate that intranasal immunization with recombinant protein ROP2 plus Quil-A can elicit both cellular and humoral immune responses in BALB/c mice. TgROP2 é uma proteína localizada nas roptrias do Toxoplasma gondii, sendo um antígeno candidato a componente de uma vacina contra a toxoplasmose. O objetivo do presente estudo foi avaliar a eficácia da TgROP2 recombinante em estimular a resposta imune celular e humoral de camundongos BALB/c após estímulo intranasal. A sequência da TgROP2 foi amplificada pela PCR a partir da cepa RH e clonada em vetor de expressão pTrc-His. Após a transformação em Escherichia coli- Rosetta 2, a pTrcHis-TgROP2 exibiu alto nível de expressão após 4 horas de indução com IPTG. A proteína recombinante apresentou uma massa molecular aparente de aproximadamente 54 kDa. Para avaliar a imunogenicidade dessa proteína recombinante, 10 camundongos receberam, pela via intranasal, 10 µg da rROP2 associado a 10 µg de Quil-A. Três doses foram realizadas nos dias 0, 21 e 42. No dia 62 do experimento, três animais foram eutanasiados para avaliar as respostas imune celular e humoral. Cinco (50%) e dois (20%) dos 10 animais apresentaram níveis de IgG (DO média = 0,307; ponto de corte = 0,240) e IgA (DO média = 0,133; ponto de corte = 0,101) acima do ponto de corte no ELISA no dia 62. A proliferação de esplenócitos revelou altos Índices de Estimulação (SI), quando as células foram cultivadas com 5, 10 e 15 µg.mL-1 de rTgROP2. Os resultados obtidos indicam que a via nasal pode estimular tanto a resposta imune celular como a humoral.
- <b>Serological survey of <i>Rickettsia</i> sp. in horses and dogs in an non-endemic area in Brazil</b>
Brazilian Spotted Fever (BSF) is a lethal rickettsiosis in humans caused by the bacteria Rickettsia rickettsii, and is endemic in some areas of Brazil. Horses and dogs are part of the disease's life cycle and they may also serve as sentinel animals in epidemiological studies. The first human BSF case in the State of Paraná was reported in 2005. The present study was conducted in the municipality of Almirante Tamandaré, where no previous case of BSF was reported. Serum samples were collected from 71 horses and 20 dogs from nine properties in the area. Ticks were also collected from these animals. All farmers completed a questionnaire about their knowledge of BSF and animal health management. Serum samples were analyzed by indirect immunofluorescent-antibody assay (IFA) using R. rickettsii and R. parkeri as antigens. Ticks were analyzed by PCR for Rickettsia sp., and all of them were PCR-negative. Six horses (8.45%) and 4 dogs (20%) were identified as seropositive. Farmers were not aware of the correlation between the presence of ticks and risk of BSF. Although a non-endemic area, Almirante Tamandaré is a vulnerable environment for BSF and effective tick control measures are required. A Febre Maculosa Brasileira (FMB) é uma riquetsiose letal para humanos, causada pela bactéria Rickettsia rickettsii, e é endêmica em algumas regiões brasileiras. Equinos e cães podem participar do ciclo da doença e podem também servir como sentinelas em estudos epidemiológicos. O primeiro caso humano relatado no Estado do Paraná ocorreu em 2005. O presente estudo foi realizado no município de Almirante Tamandaré, região onde não há relatos de casos de FMB. Foram coletadas amostras de sangue de 71 cavalos e 20 cães em nove propriedades rurais na região. Carrapatos também foram colhidos dos animais. Todos os proprietários responderam a um questionário sobre o manejo sanitário dos animais e o conhecimento a respeito da FMB. As amostras de soro foram processadas pela técnica de Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI), utilizando-se os antígenos de R. rickettsii e R. parkeri. Os carrapatos foram analisados por PCR para Rickettsia sp. e todos foram negativos. Seis cavalos (8,45%) e 4 cães (20%) foram identificados como soropositivos. Todos os proprietários desconheciam a relação de carrapatos com a FMB. Embora considerada uma área não endêmica, Almirante Tamandaré é um ambiente vulnerável à FMB e um controle eficiente de carrapatos deve ser implementado.
- <b>Dedication to Manoel Pimentel Neto - 1928<sup>*</sup>-2010<sup>†</sup>
</b>
- <b>
<i>Cryptosporidium</i>
</b>
<b> infection in Brazil</b>: <b>implications for veterinary medicine and public health</b>
The aim of this review paper is to report the results of cryptosporidiosis research in Brazil, mainly its occurrence in animals and implications for veterinary medicine and public health. An increasing number of papers related to Cryptosporidium spp. infection in Brazil are available at national and international literature. The main focus described in these papers is the occurrence of Cryptosporidium spp. in food, environmental samples, in humans and several animal species, particularly birds, cattle, dogs and cats. Using molecular biology techniques, most Cryptosporidium species and genotypes identified in other countries have been described in Brazil. In mammals, there are descriptions of infection by C. bovis, C. canis, C. felis, C. meleagridis, C. parvum, and the cervine genotype; in birds, the following species and genotypes have been described: C. baileyi, C. galli, C. meleagridis, C. parvum and the avian genotypes I, II and III. Several species have been described in humans, such as C. parvum, C. hominis, and some species adapted to animal hosts such as C. canis, C. felis and C. meleagridis. O objetivo deste trabalho foi relatar, por meio de revisão de literatura, os resultados de pesquisas sobre a criptosporidiose no Brasil, com ênfase em sua ocorrência em animais e suas implicações em medicina veterinária e em saúde pública. Um número crescente de trabalhos sobre a infecção por Cryptosporidium spp. no Brasil está disponível na literatura nacional e internacional. Nestes trabalhos, são abordados principalmente aspectos relacionados à ocorrência de Cryptosporidium spp. em alimentos, amostras ambientais, no homem e em diversas espécies animais, particularmente em aves, bovinos, cães e gatos. Por meio de técnicas de biologia molecular, a maioria das espécies e alguns genótipos identificados em outros países foram descritos no Brasil. Em mamíferos, houve identificação de C. bovis, C. canis, C. felis, C. meleagridis, C. parvum e o genótipo cervídeo; em diversas espécies de aves, foi descrita infecção por C. baileyi, C. galli, C. meleagridis, C. parvum e pelos genótipos I, II e III de aves. Várias espécies foram descritas no homem, como C. parvum e C. hominis, além de algumas espécies adaptadas a hospedeiros animais, como C. canis, C. felis e C. meleagridis.
- <b>A first record of <i>Amblyomma dissimile</i> (Acari: Ixodidae) parasitizing the lizard <i>Ameiva ameiva</i> (Teiidae) in Brazil</b>
A non-engorged adult female Amblyomma dissimile and two Amblyomma sp. larvae were found parasitizing the lizard Ameiva ameiva in the municipality of Chapadinha, State of Maranhão. This is the first record in the state of Maranhão and fills a gap in the distribution of A. dissimile in Brazil. The lizard A. ameiva represents a new host for A. dissimile, and also the first record of this tick species infesting lizards of the family Teiidae in Brazil. Uma fêmea adulta não ingurgitada de Amblyomma dissimile e duas larvas de Amblyomma sp. foram encontradas parasitando o lagarto Ameiva ameiva no município de Chapadinha, Estado do Maranhão. Além de representar um novo registro para o Estado do Maranhão, esse trabalho preenche uma lacuna de distribuição geográfica de A. dissimile no país. O lagarto A. ameiva representa um novo hospedeiro para A. dissimile, sendo também o primeiro registro dessa espécie de carrapato infestando lagartos da família Teiidae no Brasil.
- <b>First report of coenurosis in sheep in the State of Mato Grosso do Sul, Brazil</b>
This paper reports the first case of coenurosis in the State of Mato Grosso do Sul, Brazil. This disease is caused by the larval stage of the tapeworm Taenia multiceps (Leske, 1780). The animal in which the disease was diagnosed was an 18-month-old ewe from an endemic area of Southern Brazil as an imported animal among a group of 30 sheep. The clinic-pathological condition was that commonly found in herbivores affected by the disease, especially sheep. Apathy, nystagmus, intermittent blindness, circling and pressing head against obstacles were the neurological signs reported. The necropsy showed that a brain lesion in the subcortex of the right hemisphere was a bladder-like cyst measuring 4 cm in diameter filled with a translucent fluid with a large number of white spherules (protoscolices) floating. In addition to the identification of the Coenurus cerebralis protoscolices, the brain tissue lesion was histopathologically described. Este trabalho relata o primeiro caso de cenurose no Estado de Mato Grosso do Sul, Brasil. Essa doença é causada por estágios larvais de Taenia multiceps (Leske, 1780). O animal no qual foi diagnosticado, tinha cerca de 18 meses de idade, oriundo de uma área endêmica no Sul do Brasil, integrante de um grupo de 30 ovinos importados para o Estado de Mato Grosso do Sul. O quadro clínico-patológico apresentado é aquele comumente descrito para herbívoros, infectados com o agente, especialmente ovinos. Os sinais clínicos relatados foram: apatia, nistagmo, cegueira intermitente, andar em círculos e pressão da cabeça contra obstáculos. Na necropsia foi observada uma lesão, no subcórtex do hemisfério cerebral direito, caracterizada por um cisto em forma de vesícula, medindo 4 cm de diâmetro, e seu interior preenchido por líquido translúcido com grande número de pequenas esferas brancas, identificadas como protoscolices. Os protoscolices foram identificados como Coenurus cerebralis, e os tecidos do cérebro submetidos complementarmente a exames histopatológicos para descrição da lesão.
- <b>Serosurvey of antibodies against spotted fever group <i>Rickettsia</i> spp. in horse farms in Northern Paraná, Brazil</b>
Brazilian spotted fever (BSF) is an emerging disease most likely caused by Rickettsia rickettsii. The objective of the present study was to estimate the seroprevalence of BSF rickettsia infections in equines from six horse farms located in Londrina County, Paraná, Southern Brazil. Six owners of horse farms situated in Cambé, Santa Fé, Guaraci and Londrina municipalities participated in the study. All farms were located in areas where BSF has not been reported. A total of 273 horses were sampled and their sera were tested by indirect Immunofluorescence assay (IFA) using R. rickettsii and R. parkeri antigens. Titers equal to and greater than 64 were considered positive. Of 273 sera tested, 15 (5.5%) reacted to R. rickettsii and 5 (1.8%) to R. parkeri. Five out of the six farms studied revealed seropositive animals and seropositivity rate ranged from 0 to 13%. The titers ranged from 64 to 512, and four samples had a titer of 512. Nine animals reacted to R. rickettsii with titers four-fold higher than those for R. parkeri. These results suggest that horses in Northern Paraná may have been exposed to rickettsiae identical or closely related to R. rickettsii. Febre Maculosa Brasileira (FMB) é uma doença emergente, sendo Rickettsia rickettsii o seu principal agente etiológico. O objetivo deste estudo foi determinar a soroprevalência de rickettsia do grupo da febre maculosa em equinos de seis haras localizados nos municípios de Cambé, Santa Fé, Guaraci e Londrina. As propriedades eram localizadas na região Norte do Paraná onde casos de FMB ainda não foram diagnosticados. Foram colhidas amostras de sangue de 273 equinos, e os soros foram testados pela RIFI, usando R. rickettsii e R. parkeri como antígenos, considerando-se como positivos títulos >64. Entre 273 soros, 15 (5,5%) reagiram contra R. rickettsii e 5 (1,8%) para R. parkeri. Cinco de seis haras estudados tinham animais reativos, e a taxa de sororreatividade variou de 0 a 13%. Os títulos variaram de 64 para 512, e três amostras apresentaram título de 512. Nove animais reagiram para R. rickettsii com títulos quatro vezes maiores que para R. parkeri. Esses resultados sugerem que equinos no Norte do Estado do Paraná, Brasil, podem ter sido expostos a uma rickettsia idêntica ou muito próxima a R. rickettsii.
- <b>Seroprevalence of <i>Toxoplasma gondii</i> infection in swine matrices in Nova Mutum and Diamantino, Mato Grosso, Brazil</b>
This report aimed to assess the seroprevalence of Toxoplasma gondii infection in 708 swine matrices in Nova Mutum and Diamantino in the state of Mato Grosso, Central-West Brazil. Serum samples were examined by indirect fluorescent antibody test (IFAT). It was found a seroprevalence of 12.8%, considering titers >64. Therefore, the data reinforce the need for appropriate management of swine raising to minimize the risk of infection of pigs with T. gondii. No presente trabalho, objetivou-se avaliar a soroprevalência da infecção por Toxoplasma gondii, em 708 matrizes suínas dos municípios de Nova Mutum e Diamantino do Estado de Mato Grosso, Brasil. As amostras de soro foram examinadas por meio da reação de imunofluorescência indireta (RIFI). Foi encontrada a frequência de 12,8% de soros positivos, com diluições iguais ou superiores a 64. Portanto, os dados obtidos reforçam a necessidade de um manejo de criação adequado, visando à minimização do risco de infecção de suínos por T. gondii.
- <b>Occurrence of <i>Leishmania</i> (<i>Leishmania</i>) <i>chagasi</i> in a domestic cat (<i>Felis catus</i>) in Andradina, São Paulo, Brazil</b>: <b>case report</b>
This work describes natural infection by Leishmania in a domestic cat where amastigote forms of the parasite were observed in the popliteal lymph node imprint. Positive and negative serological reactions were observed by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and indirect immunofluorescence assay (IFA), respectively. Polymerase chain reaction (PCR) revealed that the nucleotide sequence of the sample was identical to Leishmania (L.) chagasi. This is the first report of the disease in felines of the city of Andradina, SP, an area considered endemic for canine and human visceral leishmaniasis. Neste trabalho, é relatada a infecção natural por Leishmania em um gato doméstico no qual, formas amastigotas do parasito foram observadas em imprint de linfonodo poplíteo. Reações sorológicas positivas e negativas foram observadas pelo teste de imunoadsorção enzimática (ELISA) e reação de imunofluorescência indireta (RIFI), respectivamente. A reação em cadeia da polimerase (PCR) revelou que a sequência de nucleotídeos foi idêntica à Leishmania (L.) chagasi. Este é o primeiro relato da doença em felino da cidade de Andradina, Estado de São Paulo, Brasil, área considerada endêmica para leishmaniose visceral canina e humana.
- <b>Ticks on birds in a forest fragment of Brazilian cerrado (savanna) in the municipality of Uberlândia, State of Minas Gerais, Brazil</b>
This is a report of ticks species, parasite prevalence and infestation intensity of birds in a forest fragment (18º 56' 57" S and 48º 12' 14" W) within the Brazilian cerrado (savanna), in the municipality of Uberlândia, State of Minas Gerais, Brazil. A total of 162 birds from 26 species were captured. One adult tick, 296 larvae and 67 nymphs were found on passerine birds. Of these, it was identified 31 larvae and 27 nymphs of Amblyomma longirostre, 17 nymphs of A. nodosum, one A. cajennense larvae and one male of Rhipicephalus sanguineus. All other ticks were identified as Amblyomma sp. larvae (n = 264) or nymphs (n = 26). Overall tick infestation intensity and prevalence were 4.32 ticks/infested bird and 52%, respectively. Sampling of host-seeking ticks on the ground within the forest during a two-year period showed only five Amblyomma sp. nymphs and one adult male of A. nodosum whereas a search for ticks on domestic animals (cattle, horses and dogs) found Rhipicephalus (Boophilus) microplus ticks. Although identification was possible in only 27% of bird ticks there seemed to be no correlation between environmental and domestic animal and bird infestation. It can be assumed that bird infestation may occur above the ground or at specific sites not sampled. Neste trabalho, são apresentadas as espécies de carrapatos em aves silvestres, sua prevalência e a intensidade de infestação em um fragmento florestal (18º 56' 57" S e 48º 12' 14" W) do Cerrado, no município de Uberlândia, Estado de Minas Gerais. Foram capturadas 162 aves de 26 espécies, mas apenas as aves Passeriformes estavam infestadas. Nestas, foram encontrados um carrapato adulto, 67 ninfas e 296 larvas. Dentre os carrapatos foi possível a identificação de 31 larvas e 27 ninfas de Amblyomma longirostre, 17 ninfas de A. nodosum, uma larva de A. cajennense e um Rhipicephalus sanguineus macho. Todos os outros carrapatos foram classificados como larvas (n = 264) ou ninfas (n = 26) de Amblyomma sp. A intensidade de infestação e a prevalência de carrapatos foram de 4,32 carrapatos/ave infestada e 52%, respectivamente. Na pesquisa de carrapatos em vida livre sobre a vegetação do fragmento florestal, foram capturados apenas cinco ninfas de Amblyomma sp. e um macho adulto de A. nodosum, por um período de dois anos. Carrapatos da espécie Rhipicephalus (Boophilus) microplus foram encontrados parasitando bovinos, cavalos e cães domésticos da região. Mesmo considerando a identificação de apenas 27% dos carrapatos das aves, parece não haver correlação entre infestação ambiental, nos animais domésticos, com a infestação das aves. Pode-se supor que a infestação das aves ocorra acima do solo ou em locais específicos não pesquisados neste trabalho.
- <b>Occurrence and molecular characterization of <i>Cryptosporidium</i> spp. isolated from domestic animals in a rural area surrounding Atlantic dry forest fragments in Teodoro Sampaio municipality, State of São Paulo, Brazil</b>
The aim of this study was to assess the occurrence of Cryptosporidium in domestic animals in rural properties surrounding rain forest fragments within the municipality of Teodoro Sampaio, southeastern Brazil. Conventional sucrose flotation method followed by molecular characterization of the parasites by sequencing PCR products amplified from SSU rRNA gene were used. Stool samples were collected from domestic animals raised as pets and livestock in all rural properties surrounding three forest fragments. Samples from cattle (197), equine (63), pigs (25), sheep (11), and dogs (28) were collected from 98 rural properties. The frequency of occurrence of Cryptosporidium within each animal species was 3.0% (6/197) among cattle and 10.7% (3/28) among dogs. Cryptosporidium was not detected in stool samples from equine, sheep, and pigs. All sequences obtained from the six samples of calves showed molecular identity with Cryptosporidium andersoni while all sequences from dog samples were similar to C. canis. The frequency of occurrence of Cryptosporidium in these domestic animal species was low. The absence of C. parvum in the present study suggests that the zoonotic cycle of cryptosporidiosis may not be relevant in the region studied. The presence of Cryptosporidium species seldom described in humans may be, otherwise, important for the wild fauna as these animals are a source of infection and dissemination of this protozoan to other animal species. The impact and magnitude of infection by C. andersoni in wild ruminants and C. canis in wild canids have to be assessed in future studies to better understand the actual importance of these species in this region. O objetivo deste estudo foi avaliar a ocorrência de Cryptosporidium, em animais domésticos de propriedades rurais ao redor de fragmentos de mata Atlântica de interior no município de Teodoro Sampaio, por exame convencional de flutuação em solução de sacarose, seguido de caracterização molecular dos parasitas através do sequenciamento dos produtos amplificados na PCR do gene SSU rRNA. Foram coletadas amostras fecais de animais domésticos criados para subsistência e estimação nas propriedades rurais do entorno de três fragmentos florestais. Amostras de bovinos (197), equinos (63), suínos (25), ovinos (11) e cães (28) foram coletadas de 98 propriedades rurais. A ocorrência de Cryptosporidium para a espécie bovina foi de 3,0% (6/197); para os cães, de 10,7% (3/28); e para os demais animais os resultados foram negativos. Todas as sequências obtidas das seis amostras de bovinos apresentaram identidade molecular com Cryptosporidium andersoni, enquanto as sequências oriundas de amostras de fezes de cães revelaram-se similares ao C. canis. A ocorrência do Cryptosporidium entre os animais estudados foi baixa. Diante dos resultados do presente estudo, o ciclo zoonótico da criptosporidiose parece ter menos importância nesta região. A presença de espécies de Cryptosporidium ainda pouco relatadas em humanos pode ser, por outro lado, importante para a fauna silvestre, uma vez que estes animais podem ser considerados como uma fonte de infecção e disseminação deste protozoário. O impacto e a magnitude da infecção de C. andersoni, em ruminantes selvagens, e de C. canis, em cães silvestres, deve ser avaliado em estudos futuros, com intuito de verificar a real importância dessas espécies nesta região.
- <b>
<i>Toxoplasma gondii</i>
</b>: <b>diagnosis of experimental and natural infection in pigeons (<i>Columba livia</i>) by serological, biological and molecular techniques</b>
This study aimed to diagnose experimental and natural Toxoplasma gondii infection in pigeons (Columba livia) by serological, biological and molecular techniques. Twelve pigeons, free of infection, were inoculated with 50 sporulated oocysts of T. gondii (VEG sample) and four remained uninfected controls. Four birds (three infected and one control) were euthanized at 15, 30, 45 and 60 days post-infection (dpi), and their tissues were used to perform a bioassay in mice and nested-PCR using B1 gene as target. Blood was obtained weekly and it was tested for the presence of anti-T. gondii antibodies by the indirect fluorescent antibody test (IFAT) and modified agglutination test (MAT). Seven (58.3%) out of 12 inoculated pigeons were positive by serological techniques and titers ranged between 1:40 and 1:5120 by MAT and between 1:512 and 1:4096 by IFAT. Complete agreement was seen between the results obtained by serological techniques and nested-PCR in seven positive birds. In the bioassay in mice, five (41.7%) out of 12 pigeons inoculated were positive to T. gondii. Only one pigeon died at 23 dpi due to toxoplasmosis. A second study with free-living pigeons was performed for detection of anti-T. gondii antibodies. Birds were captured in the municipalities of São Paulo, Ibiúna and Sorocaba, São Paulo State, Southeastern Brazil. All 126 free-living birds were negative to anti-T. gondii antibodies by MAT (titer < 1:5). Bioassays were performed in mice with tissues from all captured birds and T. gondii was not isolated in any pigeon. O presente estudo teve por objetivo diagnosticar a infecção experimental e natural pelo Toxoplasma gondii em pombos (Columba livia) por técnicas sorológicas, biológicas e moleculares. Doze pombos, livres de infecção, foram inoculados com 50 oocistos esporulados de T. gondii (amostra VEG), e quatro permaneceram como controles não infectados. Aos 15, 30, 45 e 60 dias pós-infecção (dpi), quatro aves (três infectadas e uma controle) foram sacrificadas e com seus tecidos realizou-se bioensaio em camundongos e nested-PCR, utilizando-se B1 como gene alvo. Sangue, para a pesquisa de anticorpos anti-T. gondii, foi obtido semanalmente, e a presença de anticorpos foi determinada pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e pela técnica de aglutinação modificada (MAT). Dos 12 pombos inoculados, sete (58,3%) foram positivos pelas técnicas sorológicas, apresentando títulos que variaram de 40 a 5.120 no MAT e de 512 a 4.096 na RIFI. Concordância total foi observada entre os resultados obtidos pelas técnicas sorológicas e pela nested-PCR com sete animais positivos. No bioensaio em camundongos, dos 12 pombos inoculados, cinco (41,7%) foram positivos ao T. gondii. Apenas um pombo veio a óbito no 23º dpi, devido à toxoplasmose. Um segundo estudo, com pombos de vida livre, foi realizado para a pesquisa de anticorpos anti-T. gondii. As aves foram capturadas nos municípios de São Paulo, Ibiúna e Sorocaba, Estado de São Paulo. Todos os 126 pombos de vida livre foram negativos a anticorpos anti-T. gondii, testados pelo MAT (título < 5). Foram realizados bioensaios em camundongos com tecidos de todas as aves capturadas e também, por esta técnica, T. gondii não foi isolado em nenhuma ave.
- <b>Sandflies (Psychodidae: Phlebotominae) survey in an urban transmission area of visceral leishmaniasis, Northeastern Brazil</b>
Visceral leishmaniasis (VL) is a major public health challenge in Brazil, especially in states where it is endemic. The aim of this study was to investigate the relationship of sand fly population density with environmental variables (temperature, rainfall and relative humidity) in urban areas of the city of Mossoró, Rio Grande do Norte, Northeastern Brazil. Sand flies were captured with Center Disease Control (CDC) traps installed monthly in the intra and peridomicile of three houses. Data analysis was based on the chi-square test and linear regression. A total of 7,347 sand flies were captured, being 93.85% Lutzomyia longipalpis and 6.15% Lutzomyia evandroi. Sand flies were more commonly found in the peridomicile and there was no difference between the number of males and females. The variables rainy season as well as relative humidity and rainfall, alone or together, did not have an effect on sand fly population density. However, high temperatures had a negative effect. The study of the behavior of sand flies in specific units of endemic areas can provide input to public health authorities for planning appropriate VL vector control measures. A leishmaniose visceral (LV) é um grande desafio para a saúde pública no Brasil, particularmente nos estados onde é endêmica. O objetivo deste estudo foi verificar a relação da densidade populacional de flebotomíneos com as variáveis ambientais (temperatura, precipitação de chuva e umidade relativa do ar) em bairros urbanos de Mossoró, Rio Grande do Norte. Os flebotomíneos foram capturados com armadilhas CDC instaladas mensalmente no intra e peridomicílio de três casas. A análise dos dados foi baseada no teste Qui-quadrado e na regressão linear. Foram capturados 7.347 flebotomíneos, sendo 93,85% Lutzomyia longipalpis e 6,15% Lutzomyia evandroi. Os flebotomíneos foram encontrados mais comumente no peridomicílio e nenhuma diferença significativa entre o número de machos e fêmeas foi observada. As variáveis estação chuvosa, bem como a umidade relativa e precipitação de chuva, associadas ou isoladas, não influenciou a densidade populacional dos flebotomíneos. No entanto, a alta temperatura afetou essa densidade de forma negativa. Portanto, este estudo específico em áreas endêmicas é importante, porque as agências de Saúde Pública podem usar essas informações para um planejamento adequado das medidas de controle de vetores LV.
- <b>Editorial</b>
- <b>Ehrlichiosis in Brazil</b>
Ehrlichiosis is a disease caused by rickettsial organisms belonging to the genus Ehrlichia. In Brazil, molecular and serological studies have evaluated the occurrence of Ehrlichia species in dogs, cats, wild animals and humans. Ehrlichia canis is the main species found in dogs in Brazil, although E. ewingii infection has been recently suspected in five dogs. Ehrlichia chaffeensis DNA has been detected and characterized in mash deer, whereas E. muris and E. ruminantium have not yet been identified in Brazil. Canine monocytic ehrlichiosis caused by E. canis appears to be highly endemic in several regions of Brazil, however prevalence data are not available for several regions. Ehrlichia canis DNA also has been detected and molecularly characterized in three domestic cats, and antibodies against E. canis were detected in free-ranging Neotropical felids. There is serological evidence suggesting the occurrence of human ehrlichiosis in Brazil but its etiologic agent has not yet been established. Improved molecular diagnostic resources for laboratory testing will allow better identification and characterization of ehrlichial organisms associated with human ehrlichiosis in Brazil. Erliquiose é uma doença causada por rickettsias pertencentes ao gênero Ehrlichia. No Brasil, estudos sorológicos e moleculares têm avaliado a ocorrência de espécies de Ehrlichia em cães, gatos, animais selvagens e seres humanos. Ehrlichia canis é a principal espécie em cães no Brasil, embora a infecção por E. ewingii tenha, recentemente, despertado suspeita em cinco cães. O DNA de E. chaffeensis foi detectado e caracterizado em cervo-do-pantanal, enquanto que E. muris e E. ruminantium ainda não foram identificadas no Brasil. A erliquiose monocítica canina causada pela E. canis parece ser altamente endêmica em muitas regiões do Brasil, embora dados de prevalência não estejam disponíveis em muitas delas. O DNA de E. canis também foi detectado e caracterizado em três gatos domésticos, enquanto anticorpos contra E. canis foram detectados em felídeos neotropicais de vida livre. Evidências sorológicas sugerem a ocorrência de erliquiose humana no Brasil, entretanto, o agente etiológico ainda não foi identificado. A melhoria do diagnóstico molecular promoverá a identificação e caracterização de espécies associadas à erliquiose humana no Brasil.
- <b>Phthiraptera (Arthropoda, Insecta) in <i>Gallus gallus </i>from isolated and mixed backyard rearing systems</b>
The objectives were to identify the species of chewing lice (Mallophaga) at different body sites in chickens (Gallus gallus), in isolated and mixed rearing systems, and to determine the dynamics and structure of the louse populations collected. The prevalences were 100 and 35% for chickens in the isolated and mixed systems, respectively. The species recorded were: Menopon gallinae, Menacanthus stramineus, Goniodes gigas, Goniocotes gallinae and Lipeurus caponis. The chickens in the isolated system presented more lice than did the ones in the mixed system. The most prevalent species were M. gallinae (30.58 and 62.31%) and L. caponis (29.12 and 14.49%), in the isolated and mixed systems, respectively. The preferential sites of parasitism were the dorsum, venter and wings among the chickens in the isolated system, while among the ones in the mixed system, the preferential sites were the dorsum and venter. The mean intensity of infestation in the isolated system was 111.4 for males and 19.1 for females, while in the mixed system it was 80 for males and 6.75 for females. The amplitudes of the infestation were 1-226 for males and 1-22 for females in the isolated system, while in the mixed system, the amplitudes were 1-111 and 1-8, respectively. It can be concluded that chickens reared in the isolated system harbor a greater number of lice than do chickens in the mixed system. However, the kind of rearing system does not prevent louse infestations. Objetivou-se identificar as espécies de malófagos em diferentes regiões do corpo de Gallus gallus, sob os sistemas de criação isolado e misto e determinar a dinâmica e estrutura da população. A prevalência de parasitismo foi de 100 e 35% para as aves no sistema de criação isolado e misto, respectivamente. As espécies identificadas foram: Menopon gallinae, Menacanthus stramineus, Goniodes gigas, Goniocotes gallinae e Lipeurus caponis. As aves mantidas isoladas apresentaram maior parasitismo do que aquelas sob o sistema misto de criação. As espécies mais prevalentes foram M. gallinae (30,58 e 62,31%) e L. caponis (29,12 e 14,49%), nos sistemas isolado e misto, respectivamente. As regiões do corpo preferenciais dos malófagos foram dorso, ventre e asa para as aves do sistema isolado; e o dorso e ventre para as do sistema misto. Para as aves do sistema isolado, a intensidade média de infestação para os machos foi de 111,4 e para as fêmeas foi de 19,1. E, para o sistema misto foi de 80 e 6,75 para machos e fêmeas, respectivamente. A amplitude de infestação variou de 1-226 e 1-22 para machos e fêmeas, respectivamente (sistema isolado); enquanto para o sistema misto foi de 1-111 e 1-8, para machos e fêmeas, respectivamente. Conclui-se que as aves de fundo de quintal, criadas sob o sistema isolado de criação, apresentam maior infestação por malófagos do que aquelas criadas com outras espécies de aves, embora o sistema de criação não isente as aves do parasitismo.
- <b>Selective control of <i>Rhipicephalus</i> (<i>Boophilus</i>) <i>microplus </i>in fipronil-treated cattle raised on natural pastures in Lages, State of Santa Catarina, Brazil</b>
An examination of a selective control of Rhipicephalus (Boophilus) microplus and consequent cost reduction was carried out in two areas of native pasture in the municipality of Lages, State of Santa Catarina, Southern Brazil, from May 2007 to April 2009. Forty cattle were divided into two groups of 20 animals each (conventional and selective control groups). At 14-day intervals female ticks larger than 4.5 mm found on the right flank of cattle bodies were counted, and these results multiplied by two. Fipronil 1 mg.kg-1 pour on was then administered for tick control. In the conventional group all the cattle were treated when tick count averaged more than 40 female ticks per animal while in the selective group only animals parasitized by more than 40 ticks were treated with acaricide. Every 28 days the cattle's weight was checked for cost-effective analysis. The conventional group required an additional 20 doses of fipronil compared with the selective one. There was no statistically significant differences regarding weight gain in both groups. Com o objetivo de avaliar o método de controle seletivo do Rhipicephalus (Boophilus) microplus e reduzir os custos para o controle, de maio de 2007 a abril de 2009, em duas invernadas de campo nativo no município de Lages, SC, utilizaram-se 40 bovinos que foram divididos em dois grupos (convencional e seletivo), de 20 animais cada. A cada 14 dias foi realizada a contagem das fêmeas maiores ou igual a 4,5 mm, no lado direito do corpo dos animais, e o valor obtido, multiplicado por dois. Foi utilizado fipronil 1 mg.kg-1 pour on para o controle de carrapatos. No grupo convencional, foram tratados todos os bovinos quando a média do grupo foi igual ou superior a 40 fêmeas e no grupo seletivo, foram tratados apenas os animais que apresentaram uma infestação igual ou superior a 40. A cada 28 dias foi realizada a pesagem dos animais para análise da relação custo/benefício. Foram realizadas 20 aplicações a mais do carrapaticida no grupo convencional em relação ao seletivo. Não houve diferença estatística entre o ganho de peso do grupo convencional em relação ao grupo seletivo.
- <b>
<i>Isospora coerebae</i>
</b>
<b> n. sp. </b>
<b>(Apicomplexa: Eimeriidae) from the bananaquit <i>Coereba flaveola</i> (Passeriformes: Coerebidae) in South America</b>
The present study describes a new isosporoid coccidian parasite from the bananaquit Coereba flaveola, in Brazil. This new species is similar to I. cagasebi, but it can be distinguished by the size and shape of Stieda and susbstieda bodies. Isospora coerebae n. sp. oocysts are spheroidal to sub-spheroidal, 24.8 × 23.3 µm, with a smooth and bi-layered wall, ~1.2 µm. Micropyle, oocyst residuum and polar granule are absent. Sporocysts are elongate ovoidal, 17.9 × 10.9 µm. Stieda and substieda bodies are present. Sporocyst residuum is present and sporozoites have a posterior refractile body. Um novo parasito coccídio isosporóide do caga-sebo Coereba flaveola, do Brasil, é relatado no estudo atual. Essa nova espécie é semelhante à Isospora cagasebi, no entanto, pode ser distinguida pelos tamanho e forma dos corpos de Stieda e substieda. Os oocistos de I. coerebae n. sp. são esféricos a subesféricos, 24,8 × 23,3 µm, com parede dupla e lisa, ~ 1,2 µm. A micrópila, resíduo e grânulo polar do oocisto estão ausentes. Os esporocistos são ovóides alongados, 17,9 × 10,9 µm. Os corpos de Stieda e substieda estão presentes. O resíduo do esporocisto está presente e os esporozoítos possuem um corpo refrátil posterior.
- <b>Abundance and seasonality of <i>Cochliomyia macellaria </i>(Diptera: Calliphoridae) in Southern Pantanal, Brazil</b>
Cochliomyia macellaria (Diptera: Calliphoridae), known as the secondary screwworm, occurs in the Americas and has medical-veterinary and forensic importance. This study aimed to describe the seasonal fluctuation of this species in the Pantanal region, Central-Western Brazil. From December 2004 to November 2007 fly catches using four windoriented traps baited with decaying bovine liver were carried out at the Nhumirim ranch, Nhecolândia subregion, Southern Pantanal. Traps remained active throughout the study period and collections were carried out on a weekly basis. A total of 159,397 Calliphoridae were caught and C. macellaria (57.33%) was the most abundant species. C. macellaria occurred all over the year showing a bimodal behavior with peaks in May-July (late autumn/early winter) and October-December (spring). Cochliomyia macellaria (Diptera: Calliphoridae), conhecida como mosca-varejeira, ocorre no continente americano e apresenta importância médico-veterinária e forense. O presente estudo teve como objetivo conhecer a flutuação sazonal dessa espécie na região do Pantanal. De dezembro/2004 a novembro/2007 foram realizadas coletas de dípteros na fazenda Nhumirim, sub-região da Nhecolândia, Pantanal sul-mato-grossense. Foram utilizadas quatro armadilhas orientadas pelo vento, iscadas com fígado bovino deteriorado. As armadilhas permaneceram ativas durante todo o período de estudo, e coletas foram realizadas semanalmente. Foram capturados 159.397 califorídeos, sendo C. macellaria (57,33%) a espécie mais abundante. C. macellaria foi observada em todos os meses do ano, apresentando comportamento bimodal com picos populacionais em maio/julho (final de outono/início de inverno) e outubro/dezembro (primavera).
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<i>In vitro</i>
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<b> activity of <i>Artemisia annua</i> L (Asteraceae) extracts against <i>Rhipicephalus</i> (<i>Boophilus</i>) <i>microplus</i>
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The activity of plant extracts on parasites may indicate groups of substances that are potentially useful for controlling Rhipicephalus (Boophilus) microplus. The aim of the present study was to investigate the in vitro action of Artemisia annua extracts on this tick. The concentrations of the sesquiterpene lactones artemisinin and deoxyartemisinin present in plant extracts were quantified via high-performance liquid chromatography. Four extracts produced from the concentrated crude extract (CCE) were evaluated on larvae using the impregnated paper method, with readings after 24 hours of incubation. The engorged females were immersed in the CCE and in its four derived extracts for five minutes, with incubation for subsequent analysis of biological parameters. The extracts were not effective on the larvae at the concentrations tested (3.1 to 50 mg.mL-1). The CCE showed greater efficacy on engorged females (EC50 of 130.6 mg.mL-1 and EC90 of 302.9 mg.mL-1) than did the derived extracts. These results tend to confirm that the action of artemisinin on engorged females of R.(B.) microplus is conditional to their blood intake. In this case, in vitro methods would be inadequate for effective evaluation of the action of A. annua on R. (B.) microplus. A atividade de extratos vegetais sobre parasitas pode indicar grupos de substâncias de uso potencial no controle de Rhipicephalus (Boophilus) microplus. O objetivo do presente estudo foi investigar a ação in vitro de extratos de Artemisia annua sobre esta espécie. A concentração das lactonas sesquiterpênicas artemisinina e deoxiartemisinina presentes nos extratos vegetais, foi quantificada via cromatografia líquida de alta eficiência. Quatro extratos produzidos a partir do extrato bruto concentrado (EBC) foram avaliados sobre larvas pela metodologia do papel impregnado, com leitura após 24 horas de incubação. As fêmeas ingurgitadas foram imersas por cinco minutos no EBC e nos seus quatro extratos derivados, e incubadas para posterior análise dos parâmetros biológicos. Os extratos não tiveram eficácia sobre as larvas nas concentrações avaliadas (de 3,1 a 50 mg.mL-1). O EBC apresentou melhor eficácia sobre as fêmeas ingurgitadas (CE 50 de 130,6 mg.mL-1 e CE 90 de 302,9 mg.mL-1) que os extratos derivados. Esses resultados tendem a confirmar que a ação da artemisinina sobre as fêmeas ingurgitadas de R. (B.) microplus estaria condicionada à sua ingestão através do sangue. Nesse caso, os métodos in vitro seriam inadequados para a efetiva avaliação da ação de A. annua R.(B.) microplus.
- <b>The use of conjunctival swab samples for PCR screening for visceral leishmaniasis in vaccinated dogs</b>
The polymerase chain reaction (PCR) has been shown to provide a rapid and sensitive technique for Leishmania detection. The aim of this study was to evaluate the technique of noninvasive conjunctival swabs (CS) as a sampling method for molecular screening for visceral leishmaniasis (VL) in a group of 42 police dogs, all of them vaccinated against VL, and to compare the results with those obtained by serological tests. The serological assays were performed independently by three laboratories. Laboratories 1 and 2 were private laboratories and laboratory 3 was the National Reference Laboratory. The first serological screening performed by laboratory 1 showed 15 reactive dogs and 4 indeterminate. Laboratory 2 confirmed only 3 reactive dogs and 2 indeterminate. Laboratory 3 confirmed 7 reactive dogs and 3 indeterminate. The PCR diagnosis using the CS procedure was performed on all 42 animals and was able to detect Leishmania DNA in 17 dogs. The PCR assay confirmed all the cases that were simultaneously reactive in the serological tests by two laboratories. The results showed that the CS technique was a sensitive and practical method for sample collection, thus allowing reliable diagnostic tests through PCR. A PCR (do inglês Polymerase Chain Reaction) tem demonstrado ser uma técnica rápida e sensível para detecção de Leishmania. O objetivo deste estudo foi avaliar a técnica não invasiva do swab conjuntival na identificação por PCR de animais infectados em um grupo de 42 cães policiais, todos vacinados contra a Leishmaniose Visceral (VL), e comparar os resultados com aqueles obtidos pelos testes sorológicos. Os ensaios sorológicos foram realizados independentemente por três laboratórios. Os laboratórios 1 e 2 eram privados. O laboratório 3 era o Laboratório de Referência Nacional. A primeira triagem sorológica realizada pelo laboratório 1 apresentou 15 cães reativos e 4 indeterminados. O laboratório 2 confirmou apenas 3 cães reativos e 2 animais indeterminados. O laboratório 3 confirmou 7 cães reativos e 3 cães foram classificados como indeterminados. O diagnóstico pela PCR, utilizando o procedimento do swab conjuntival, foi realizado em todos os 42 animais e foi capaz de detectar DNA de Leishmania em 17 cães. A PCR confirmou todos os casos simultaneamente reativos nos testes sorológicos de dois laboratórios. Os resultados demonstraram que o swab conjuntival é um método sensível e prático para coleta de amostra, permitindo um diagnóstico consistente através da PCR.
- <b>A novel A2 allele found in <i>Leishmania</i> (<i>Leishmania</i>) <i>infantum chagasi</i>
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Visceral leishmaniasis (VL) is a widely spread zoonotic disease. In Brazil the disease is caused by Leishmania (Leishmania) infantum chagasi. Peridomestic sandflies acquire the etiological agent by feeding on blood of infected reservoir animals, such as dogs or wildlife. The disease is endemic in Brazil and epidemic foci have been reported in densely populated cities all over the country. Many clinical features of Leishmania infection are related to the host-parasite relationship, and many candidate virulence factors in parasites that cause VL have been studied such as A2 genes. The A2 gene was first isolated in 1994 and then in 2005 three new alleles were described in Leishmania (Leishmania) infantum. In the present study we amplified by polymerase chain reaction (PCR) and sequenced the A2 gene from the genome of a clonal population of L. (L.) infantum chagasi VL parasites. The L. (L.) infantum chagasi A2 gene was amplified, cloned, and sequenced in. The amplified fragment showed approximately 90% similarity with another A2 allele amplified in Leishmania (Leishmania) donovani and in L.(L.) infantum described in literature. However, nucleotide translation shows differences in protein amino acid sequence, which may be essential to determine the variability of A2 genes in the species of the L. (L.) donovani complex and represents an additional tool to help understanding the role this gene family may have in establishing virulence and immunity in visceral leishmaniasis. This knowledge is important for the development of more accurate diagnostic tests and effective tools for disease control. A leishmaniose visceral (LV) é uma zoonose amplamente disseminada, causada no Brasil pela Leishmania (Leishmania) infantum chagasi. Flebotomíneos vetores adquirem o agente etiológico, alimentando-se do sangue de animais contaminados, como cachorros ou animais selvagens. A doença é endêmica no Brasil, e focos de epidemia são relatados em cidades densamente povoadas por todo o país. Muitas manifestações clínicas relacionadas à infecção por Leishmania estão ligadas à relação parasito-hospedeiro, e vários possíveis fatores de virulência dos parasitas, que causam a LV, são alvos de estudo, tais como os genes A2. O gene A2 foi isolado pela primeira vez em 1994 e, em seguida, em 2005, três novos alelos foram descritos em Leishmania (Leishmania) infantum. No presente estudo, um fragmento do gene A2 de uma população clonal de L.(L.) infantum chagasi foi amplificado por PCR e sua sequência de nucleotídeos determinada. O fragmento mostrou 90% de similaridade com alelos do gene A2 de Leishmania (Leishmania) donovani e de L. (L.) infantum, descritos na literatura. Entretanto, a tradução da sequência de nucleotídeos mostra diferenças na sequência de aminoácidos da proteína, que podem ser essenciais em determinar a variabilidade do gene A2 em espécies do complexo L. (L.) donovani e representa uma ferramenta adicional na compreenssão do papel dessa família de genes na virulência e imunidade da leishmaniose visceral. O conhecimento dessa variação é importante para o desenvolvimento de testes diagnósticos mais precisos e ferramentas mais eficazes no controle da doença.
- <b>Prevalence of liver condemnation due to bovine fasciolosis in Southern Espírito Santo</b>: <b>temporal distribution and economic losses</b>
The present study was conducted to evaluate the economic losses and temporal distribution of the prevalence of liver condemnation due to bovine fasciolosis. The abattoir in Atílio Vivácqua, in the South of the State of Espírito Santo, which is under state inspection by the veterinary service of the Livestock and Forest Protection Institute of Espírito Santo, was used as the data source. The prevalence of liver condemnation due to fasciolosis over the period 2006-2009 was calculated. The χ2 test, simple linear regression analysis and χ2 for trend were used, with a significance level of p < 0.05. Over the period analyzed, 110,956 cattle were slaughtered and the prevalence of liver condemnation due to Fasciola hepatica was 15.24% in 2006, 23.93% in 2007, 28.57% in 2008 and 28.24% in 2009. The historical trend of liver condemnation is an increasing trend, thus indicating that this parasitism has become established in the herd as a problem in this region, with prevalence similar to that of traditionally endemic regions. Condemnations occurred throughout the year, with the highest prevalence in April and May and with significant differences between the dry and wet seasons. The economic losses from liver condemnation can be considered high. O presente trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar as perdas econômicas e a distribuição temporal da prevalência de condenação de fígados bovinos devido a fasciolose. O matadouro frigorífico de Atílio Vivácqua, no sul do Estado do Espírito Santo, com inspeção estadual, realizada por médico veterinário vinculado ao Instituto de Defesa Agropecuária e Florestal do Espírito Santo, foi utilizado como fonte de dados. A prevalência de condenação de fígados por fasciolose no período de 2006-2009 foi calculada. O teste do χ2, a análise de regressão linear simples e o χ2 para tendência foram utilizados, considerando-se o nível de significância p < 0,05. No período analisado foram abatidos 110.956 bovinos, observando-se prevalências de condenação de fígados por Fasciola hepatica, de 15,24% em 2006, 23,93% em 2007, 28,57% em 2008 e de 28,24% em 2009. A tendência histórica da condenação de fígados é crescente, indicando que este parasitismo estabeleceu-se no rebanho como um problema na região com prevalência similar a de regiões tradicionalmente endêmicas. As condenações ocorreram o ano todo com maior prevalência nos meses de abril e maio e com diferenças significativas entre os períodos seco e chuvoso. As perdas econômicas devido a condenação de fígados podem ser consideradas altas.
- <b>Production of recombinant EMA-1 protein and its application for the diagnosis of <i>Theileria equi</i> using an enzyme immunoassay in horses from São Paulo State, Brazil</b>
The erythrocytic-stage surface protein, Equi Merozoite Antigen 1 (EMA-1), is a major candidate for the development of a diagnostic antigen for equine piroplasmosis. In order to establish an effective diagnostic method for practical use, the gene encoding the entire EMA-1 of Theileria equi Jaboticabal strain was cloned and expressed in Escherichia coli as a histidine-tagged protein (His6-EMA1). The expressed EMA-1 reacted with specific antibodies in Western blot and had an apparent molecular mass of 34 kDa which was largely consistent with its theoretical value. The nucleotide sequence of the EMA-1 gene of Jaboticabal strain was comparatively analyzed with other published sequences. The results indicated a high degree of homology with EMA-1 genes of all other strains isolated from various countries. The recombinant purified His6-EMA1 protein was tested in an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the detection of antibodies anti-T. equi in horses. The ELISA clearly differentiated T. equi-infected from Babesia caballi-infected horse sera or normal horse sera. Field serum samples collected from horses in the State of São Paulo, Southeastern Brazil, were examined for the diagnosis of T. equi infection by ELISA. Of 170 samples analyzed, 95.88% (163/170) were positive for T. equi infection. These results suggest that the His6-EMA1 protein expressed in E. coli could be a reliable immunodiagnostic antigen for ELISA test and that T. equi infection is a serious concern in the State of São Paulo, Brazil. A proteína de superfície eritrocitária, Antígeno 1 do Merozoíta de Theileria equi (EMA-1), é um potencial candidato para o desenvolvimento de antígenos de valor diagnóstico para a piroplasmose equina. Com o objetivo de estabelecer um método de diagnóstico efetivo e prático, o gene EMA-1 da amostra Jaboticabal - SP de T. equi foi clonado e expresso em Escherichia coli contendo uma cauda de poli-histidina (His6-EMA1). O EMA-1 expresso reagiu com anticorpos específicos no Western blot e apresentou peso molecular aparente de 34 kDa, sendo altamente consistente com seu valor teórico. A sequência nucleotídica do gene EMA-1 da amostra Jaboticabal foi analisado comparativamente com outras sequências públicas, e os resultados indicam elevado grau de homologia com amostras de diversos países. A proteína recombinante purificada His6-EMA1 foi testada no ensaio imunoenzimático (ELISA) para a detecção de anticorpos anti-T. equi em equinos. O teste de ELISA diferenciou-se claramente entre soros de equinos infectados por T. equi, soros de animais infectados por Babesia caballi e soro normal de equino. Amostras de soros coletadas de equinos do Estado de São Paulo, sudeste do Brasil, foram examinadas para o diagnóstico da infecção por T. equi pelo ELISA. Das 170 amostras analisadas, 95,88% (163/170) foram positivas para T. equi. Os resultados sugerem que a proteína His6-EMA1 expressa em E. coli pode ser um antígeno confiável para diagnóstico imunológico pelo teste de ELISA, e que T. equi merece grande atenção no Estado de São Paulo.
- <b>Metazoan endoparasites of <i>Serrasalmus marginatus </i>(Characiformes: Serrasalminae) in the Negro River, Pantanal, Brazil</b>
In order to inventory the metazoan endoparasites of Serrasalmus marginatus, 91 specimens were examined. They were captured in the Negro River in Pantanal wetland, State of Mato Grosso do Sul, Central-Western Brazil, from October 2007 to August 2008. Parasites of six taxa were recovered: Procamallanus (Spirocamallanus) inopinatus, Contracaecum sp. (Nematoda), metacercarial type Diplostomulum (Digenea), Brevimulticaecum sp. (Nematoda) and Sebekia oxycephala, Subtriquetra sp. 1 and Subtriquetra sp. 2 (Pentastomida). The latter five species are reported for the first time in S. marginatus. Com o objetivo de inventariar os metazoários endoparasitos em Serrasalmus marginatus, no Rio Negro, Pantanal, Mato Grosso do Sul, Brasil, foram examinados 91 espécimes capturados no período de outubro de 2007 a agosto de 2008. Foram registrados seis táxons parasitos: Procamallanus (Spirocamallanus) inopinatus, Contracaecum sp. (Nematoda), metacercária do tipo Diplostomulum (Digenea); Brevimulticaecum sp. (Nematoda); e Sebekia oxycephala, Subtriquetra sp. 1 e Subtriquetra sp. 2 (Pentastomida). As últimas cinco espécies citadas são registradas pela primeira vez em S. marginatus.
- <b>Active surveillance of canine visceral leishmaniasis and american trypanossomiasis in rural dogs from non endemic area</b>
The canine visceral leishmaniasis (CVL) and american trypanosomiasis are important zoonoses in public health and dogs are the main domestic reservoir of the parasite for humans. The goal of this study was to estimate the prevalence of circulating antibodies anti-Trypanosoma cruzi and anti-Leishmania sp. in sera of dogs from the rural area of Botucatu, SP, Brazil. During the annual vaccination campaign against canine rabies in rural area, 689 blood samples were taken and processed by indirect immunofluorescent antibody test. The serological tests revealed the absence of antibodies anti-Leishmania spp., but anti-T. cruzi antibodies were detected in 3 (0.4%) dogs. A leishmaniose visceral canina (LVC) e a tripanossomíase americana são importantes zoonoses para a saúde pública que encontram no cão o principal reservatório doméstico para o homem. O trabalho procurou estimar a prevalência de anticorpos circulantes anti-Trypanosoma cruzi e anti-Leishmania spp., em amostras de cães provenientes da zona rural do município de Botucatu, SP. Durante a campanha de vacinação antirrábica canina da zona rural do município, foram coletadas 689 amostras de soro e processadas pela técnica de imunofluorescência indireta. Os testes sorológicos revelaram a ausência de anticorpos anti-Leishmania spp. e, na pesquisa dos anticorpos anti-T. cruzi, foram detectados 3 (0,4%) cães.
- <b>Histopathology of gills of <i>Piaractus mesopotamicus </i>(Holmberg, 1887) and <i>Prochilodus lineatus</i> (Valenciennes, 1836) infested by monogenean and myxosporea, caugth in Aquidauana River, State of Mato Grosso do Sul, Brazil</b>
A histological analysis was conducted on the gills of 15 Piaractus mesopotamicus and 19 Prochilodus lineatus specimens collected between April and November 2004 from the Aquidauana River, State of Mato Grosso do Sul, Central-West Brazil, to describe the anatomopathological characteristics of the gills of these freshwater fish. Gill samples were fixated in 10% buffered formalin and processed following histological routine procedures. The histological examination of the gills of P. mesopotamicus revealed intralamellar monogenean and mixosporean cysts of Henneguya piaractus at several developmental stages over the entire (basal, median and distal) lamella. Intraepithelial cysts caused lamella dilation and deformity of adjacent lamellae. In P. lineatus gills, monogenean cysts were detected. In both host species, hyperplasia of the gill epithelium and structural disorganization of secondary lamellae was seen diffusely in the gills, leading to fused lamellae in the gills. In few cases, there was found mononuclear inflammatory cells and hemorrhagic focal points distally in the lamellae. Realizou-se análise histológica de brânquias de 15 espécimes de Piaractus mesopotamicus e 19 Prochilodus lineatus coletados de abril a novembro de 2004, no Rio Aquidauana, MS, com intuito de contribuir com achados anatomopatológicos em brânquias dessas espécies de peixes de água doce. Amostras de brânquias foram fixadas em formalina 10%, tamponadas e processadas conforme rotina histológica. Em P. mesopotamicus observou-se presença de monogênea e cistos de mixosporídio da espécie Henneguya piaractus, com localização intralamelar em vários estágios de desenvolvimento, localizados em todas as regiões (basal, mediana ou distal) das lamelas. Cistos intraepiteliais causaram dilatação e deformação das lamelas vizinhas. Em brânquias de P. lineatus, observou-se presença de monogênea. Nas duas espécies de hospedeiro foram registradas hiperplasia do epitélio branquial e desorganização estrutural das lamelas em extensas regiões, alterações que causaram a fusão lamelar. Em poucos casos registrou-se presença de células inflamatórias mononucleares e focos hemorrágicos na região distal das lamelas.
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<i>Ehrlichia canis</i>
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<b> (Jaboticabal strain) induces the expression of TNF-</b>α<b> in leukocytes and splenocytes of experimentally infected dogs</b>
Canine ehrlichiosis is caused by the bacterium Ehrlichia canis and is characterized by a systemic febrile disease of unknown pathogenesis. This study evaluated the expression of cytokines TNF-α, IL-10, IFN-γ, in splenic cells and blood leukocytes during the acute phase of ehrlichiosis and after treatment with doxycycline hyclate in dogs experimentally infected with the E. canis Jaboticabal strain. The study results showed a significant expression of TNF-α 18 days post-inoculation, reducing by approximately 70% after treatment. There was a unique peak of expression of IL-10 and IFN-γ 18 and 30 days post-inoculation, respectively. This study suggests that TNF-α plays a role in the pathogenesis of the acute phase of canine ehrlichiosis and that treatment with doxycycline hyclate reduces the systemic effects of this cytokine, possibly by reducing or eliminating parasitemia. A erliquiose canina é causada pela bactéria Ehrlichia canis, que desencadeia no hospedeiro uma doença febril e sistêmica, de patogênese pouco conhecida. O presente estudo avaliou a expressão das citocinas TNF-α, IL-10, IFN-γ, em células esplênicas e em leucócitos sanguíneos, durante a fase aguda da erliquiose e após o tratamento com hiclato de doxiciclina, em cães experimentalmente infectados com a amostra E. canis Jaboticabal. Os resultados mostraram expressão significativa de TNF-α 18 dias após a inoculação, reduzindo aproximadante 70% após o tratamento. Houve um único pico de expressão de IL-10 e de IFN-γ entre 18 e 30 dias após a inoculação, respectivamente. Este estudo sugere que o TNF-α participa da patogenia da fase aguda da erliquiose canina, e que o tratamento com hiclato de doxiciclina reduz os efeitos sistêmicos dessa citocina, possivelmente por reduzir ou eliminar a parasitemia.
- <b>Use of a <i>Mycoplasma suis</i>-PCR protocol for screening a population of captive peccaries (<i>Tayassu tajacu</i> and <i>Tayassu pecari</i>)</b>
Mycoplasma suis is a hemotropic bacteria of red blood cells and the causative agent of swine eperythrozoonosis. Diagnosis of infection may be reached by direct examination of blood smears; however, the use of polymerase chain reaction (PCR) of the 16S RNA gene of M. suis improves the sensitivity and specificity of detection. The aim of this study was to screen peccaries (Tayassu tajacu and T. pecari) for M. suis infection using a specific conventional PCR. A total of 28 blood samples from captive collared and white-lipped peccaries were collected, DNA extracted and a specific M. suis PCR assay performed. All samples were negatives by both blood smear examination and PCR testing. To verify the presence of amplifiable DNA, PCR for beta-actin gene was performed in all samples. This study was part of an active surveillance program, which is crucial for monitoring animal health status, particularly in wildlife species. Mycoplasma suis é uma bactéria hemotrópica dos eritrócitos e é o agente causador da eperitrozoonose suína. O diagnóstico da infecção pode ser realizado pelo exame direto de esfregaços sanguíneos; entretanto, o uso da reação em cadeia da polimerase (PCR) baseada no gene 16S RNA de M. suis aumenta a sensibilidade e especificidade da detecção. O objetivo deste estudo foi avaliar catetos e queixadas (Tayassu tajacu e T. pecari) para a infecção por M. suis, utilizando PCR convencional específico. Um total de 28 amostras de sangue de catetos e queixadas de cativeiro foram coletadas, o DNA foi extraído e a PCR específica para a detecção de M. suis realizada. Todas as amostras foram negativas pelo esfregaço sanguíneo e PCR. Para verificar a presença de DNA amplificável, PCR para o gene da beta actina foi realizada em todas as amostras. Este estudo foi parte de um programa de vigilância ativa, o qual é crucial para o monitoramento do estado de saúde animal, particularmente em espécies selvagens.
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